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Tritium
via la réparation de bases oxydées accumulées dans une même région. En effet
lorsque les bases oxydées sont concentrées dans une même région, elles peuvent
être réparties sur les deux brins complémentaires de l’ADN. Lors de la réparation
retape d’incision va cliver les deux brins d’ADN complémentaires conduisant
a la formation d une cassure double brin. En cohérence avec ces données, une
augmentation de la mutagenèse a été observée aussi bien chez les micro-organismes que dans les cellules de mammifères (Phillips et al., 1912; Burki et
Moustacchi, 1978; Ito et Kobayashi, 1978; Ise et al., 1984; Konevega et Kalinin,
2000; Ueno et al., 1982; Korolev et Ivanov, 1985; Little et Lambert, 2008). Chez
la levure Saccharomyces cerevisiae, une préférence de mutation GC vers AT
est cohérente avec la formation de 8-oxo-guanine qui provient de l’oxydation de
la guanine (Korolev et Ivanov, 1985). Chez les mammifères, plusieurs loci ont
ete analysés, mais le plus fréquemment étudié a été le locus HPRT (les mutants
deviennent résistants à la 6-thioguanine et peuvent ainsi être sélectionnés).
Cependant, les mutants au locus HPRT peuvent correspondre à des substitutions
e base mais aussi à des délétions. Un spectre de mutagenèse serait informatif et
evrait permettre de déterminer la fraction de mutagenèse due aux bases oxydées
et celle provenant des cassures de l’ADN.
Chez les mammifères, de nombreuses études cytogénétiques montrent la
production de remaniements chromosomiques (Little et Lambert, 2008). Lors
une incorporation de thymidine tritiée par les cellules, des cassures double brin
( DB) de l’ADN se forment et la formation de foyers y-H2AX indique la présence
eÇDB (Saintigny et al., 2008). En effet, lorsque des CDB se forment, le variant
istone H2AX est phophorylée (y-H2AX) au site de cassure; un anticorps
spécifique de la forme phosphorylée permet de détecter par immuno-cytofluorescence, les foyers y-H2AX qui marquent donc les CDB (Rogakou, 1999). Les CDB
sont réparées soit par recombinaison homologue (RH) ou par ligature d'extrémités
110,1homologue (NHEJ pour non homologous end joining). Il a été montré que les
uucéotides tritiés stimulent fortement la RH aussi bien dans la levure (Burki et
oustacchi, 1977; Morrison et al., 1981) que dans les cellules de mammifères
(Saintigny et al., 2008); de plus, les mutants de RH ainsi que de NHEJ montrent
2()noSenS'^^^^ accrue à la contamination à la thymidine tritiée (Saintigny et al.,
)• La RH permet l’échange de matériel génétique entre séquences dADN
. œnologues, aboutissant à des conversions géniques associées ou non à des cros5 ng over, donc potentiellement à des réarrangements génétiques. Si la RH est
I Cessa'æ au maintien de la stabilité du génome, un excès de RH peut conduite
j e nombreux réarrangements génétiques, compte tenu du nombre impôt tant de
» ^Uences répétées dispersées dans le génome.
: En conclusion, la présence de 3H-thymidine peut induire des altérations géné:
aUSS* b'en
'a mutagenèse par substitution de bases, que par réarrangei
génétiques. La conséquence majeure est la production de cellules viables
«
cases de remaniements génétiques.
Tritium
via la réparation de bases oxydées accumulées dans une même région. En effet
lorsque les bases oxydées sont concentrées dans une même région, elles peuvent
être réparties sur les deux brins complémentaires de l’ADN. Lors de la réparation
retape d’incision va cliver les deux brins d’ADN complémentaires conduisant
a la formation d une cassure double brin. En cohérence avec ces données, une
augmentation de la mutagenèse a été observée aussi bien chez les micro-organismes que dans les cellules de mammifères (Phillips et al., 1912; Burki et
Moustacchi, 1978; Ito et Kobayashi, 1978; Ise et al., 1984; Konevega et Kalinin,
2000; Ueno et al., 1982; Korolev et Ivanov, 1985; Little et Lambert, 2008). Chez
la levure Saccharomyces cerevisiae, une préférence de mutation GC vers AT
est cohérente avec la formation de 8-oxo-guanine qui provient de l’oxydation de
la guanine (Korolev et Ivanov, 1985). Chez les mammifères, plusieurs loci ont
ete analysés, mais le plus fréquemment étudié a été le locus HPRT (les mutants
deviennent résistants à la 6-thioguanine et peuvent ainsi être sélectionnés).
Cependant, les mutants au locus HPRT peuvent correspondre à des substitutions
e base mais aussi à des délétions. Un spectre de mutagenèse serait informatif et
evrait permettre de déterminer la fraction de mutagenèse due aux bases oxydées
et celle provenant des cassures de l’ADN.
Chez les mammifères, de nombreuses études cytogénétiques montrent la
production de remaniements chromosomiques (Little et Lambert, 2008). Lors
une incorporation de thymidine tritiée par les cellules, des cassures double brin
( DB) de l’ADN se forment et la formation de foyers y-H2AX indique la présence
eÇDB (Saintigny et al., 2008). En effet, lorsque des CDB se forment, le variant
istone H2AX est phophorylée (y-H2AX) au site de cassure; un anticorps
spécifique de la forme phosphorylée permet de détecter par immuno-cytofluorescence, les foyers y-H2AX qui marquent donc les CDB (Rogakou, 1999). Les CDB
sont réparées soit par recombinaison homologue (RH) ou par ligature d'extrémités
110,1homologue (NHEJ pour non homologous end joining). Il a été montré que les
uucéotides tritiés stimulent fortement la RH aussi bien dans la levure (Burki et
oustacchi, 1977; Morrison et al., 1981) que dans les cellules de mammifères
(Saintigny et al., 2008); de plus, les mutants de RH ainsi que de NHEJ montrent
2()noSenS'^^^^ accrue à la contamination à la thymidine tritiée (Saintigny et al.,
)• La RH permet l’échange de matériel génétique entre séquences dADN
. œnologues, aboutissant à des conversions géniques associées ou non à des cros5 ng over, donc potentiellement à des réarrangements génétiques. Si la RH est
I Cessa'æ au maintien de la stabilité du génome, un excès de RH peut conduite
j e nombreux réarrangements génétiques, compte tenu du nombre impôt tant de
» ^Uences répétées dispersées dans le génome.
: En conclusion, la présence de 3H-thymidine peut induire des altérations géné:
aUSS* b'en
'a mutagenèse par substitution de bases, que par réarrangei
génétiques. La conséquence majeure est la production de cellules viables
«
cases de remaniements génétiques.