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Toxicologie nucléaire environnementale et humaine
nng (Valverde et al., 2009) ou de l’écotoxicologie (An, 2008). Tous ces éléments
e’1 °nt Line meth°de très répandue et de nombreuses publications détaillent les
dit erentes versions, des recommandations d’utilisation, de standardisation et
de traitement des données (Tice et al., 2000). Le test dans sa version in vivo (sur
issu hépatique de l’animal) pourrait devenir un test réglementaire en toxicologie
(Burhnson et al., 2007).
La grande sensibilité de la méthode des comètes en fait un outil délicat à manier
■ k'i\lesPect e piotocoles très standardisés peut introduire des problèmes de
tativp 1-1 e imP°rtante entre les expériences. Les données obtenues sont qualinart
° m nexPllment Pas une quantité précise d’une lésion donnée. D’autre
j
’
me ° eS ^uandtatives de mesure de lésions sont applicables pour des
de génotoxiques beaucoup plus élevées que la méthode des comètes.
tComJt!pi«u^SOn
teSt des comètes avec la technique d’hybridation in situ
sénupnepe
' p6™61 de v’sual*ser des événements se déroulant au niveau de
la sen
(Glei pt ni ?nno\qUe P°U1 comParer les vitesses de réparation de différents gènes
\vjici e/ u/,5 zuuy).
est neu cnpp'f"68 Cassures double brin par la version neutre du test des comètes
double brin J1
116 dei met Pas de distinguer avec certitude les cassures
double brin des cassures simple brin de l’ADN.
permettant la^68 veis'ons du test des comètes, comme toutes les méthodes
nation d’une oi/næ • 6 /S^ons de l’ADN, s’appliquent aussi bien à la détermiqu’au suivi de^
' ° ‘mtlale de lésions créées par un stress génotoxique donné,
qu au suivi de la reparation de ces mêmes lésions
À 1.2. Méthodes chromatographiques
monomères Iptès extracüon
f 1ADN P6Ut être effectuée aPrès hydrolyse en
des nucléosides (hvdrolvsp ’
detectlon des bases (en cas d’hydrolyse acide) ou
très large excès dp
enzymatique) anormaux dans un mélange contenant un
On peut ainsi citer . lai0I)’0meres normaux se réalise ensuite par chromatographie,
mesure de la 8-oxodpC 110™at°graphie liquide associée à l’électrochimie (pour la ।
spectrométrie de masse nour7XT7’8’dlhydr0'2,‘désOXyguanosine^ ou couplée à , la §
dommages. L’intérêt de
P'US VeFSatile d’un très grand nombre de j
titatif. Leurs limitatinnf8 aPProc^es est leur grande spécificité et leur aspect quan- ।
ainsi que le risque d’rw
3 grande quantité d’ADN nécessaire (au moins 5 |tg), 5
classer dans ces anorop/ "i1011 artdfactuelle liée à l’extraction de l’ADN. On peut §
une mesure de radioactif 'a'nethode de marquage au 32P de nucléotides associée à ?
e- ette technique est très sensible mais peu quantitative, j
/ / / J Mé,hodesdebi»logie Séculaire
1
J
f l
du taux de lésions. Unp nr eaCt}ori >y (PCR) peut aussi être utilisée pour la mesure ,
emiere technique consiste à cibler un fragment d’ADN
Toxicologie nucléaire environnementale et humaine
nng (Valverde et al., 2009) ou de l’écotoxicologie (An, 2008). Tous ces éléments
e’1 °nt Line meth°de très répandue et de nombreuses publications détaillent les
dit erentes versions, des recommandations d’utilisation, de standardisation et
de traitement des données (Tice et al., 2000). Le test dans sa version in vivo (sur
issu hépatique de l’animal) pourrait devenir un test réglementaire en toxicologie
(Burhnson et al., 2007).
La grande sensibilité de la méthode des comètes en fait un outil délicat à manier
■ k'i\lesPect e piotocoles très standardisés peut introduire des problèmes de
tativp 1-1 e imP°rtante entre les expériences. Les données obtenues sont qualinart
° m nexPllment Pas une quantité précise d’une lésion donnée. D’autre
j
’
me ° eS ^uandtatives de mesure de lésions sont applicables pour des
de génotoxiques beaucoup plus élevées que la méthode des comètes.
tComJt!pi«u^SOn
teSt des comètes avec la technique d’hybridation in situ
sénupnepe
' p6™61 de v’sual*ser des événements se déroulant au niveau de
la sen
(Glei pt ni ?nno\qUe P°U1 comParer les vitesses de réparation de différents gènes
\vjici e/ u/,5 zuuy).
est neu cnpp'f"68 Cassures double brin par la version neutre du test des comètes
double brin J1
116 dei met Pas de distinguer avec certitude les cassures
double brin des cassures simple brin de l’ADN.
permettant la^68 veis'ons du test des comètes, comme toutes les méthodes
nation d’une oi/næ • 6 /S^ons de l’ADN, s’appliquent aussi bien à la détermiqu’au suivi de^
' ° ‘mtlale de lésions créées par un stress génotoxique donné,
qu au suivi de la reparation de ces mêmes lésions
À 1.2. Méthodes chromatographiques
monomères Iptès extracüon
f 1ADN P6Ut être effectuée aPrès hydrolyse en
des nucléosides (hvdrolvsp ’
detectlon des bases (en cas d’hydrolyse acide) ou
très large excès dp
enzymatique) anormaux dans un mélange contenant un
On peut ainsi citer . lai0I)’0meres normaux se réalise ensuite par chromatographie,
mesure de la 8-oxodpC 110™at°graphie liquide associée à l’électrochimie (pour la ।
spectrométrie de masse nour7XT7’8’dlhydr0'2,‘désOXyguanosine^ ou couplée à , la §
dommages. L’intérêt de
P'US VeFSatile d’un très grand nombre de j
titatif. Leurs limitatinnf8 aPProc^es est leur grande spécificité et leur aspect quan- ।
ainsi que le risque d’rw
3 grande quantité d’ADN nécessaire (au moins 5 |tg), 5
classer dans ces anorop/ "i1011 artdfactuelle liée à l’extraction de l’ADN. On peut §
une mesure de radioactif 'a'nethode de marquage au 32P de nucléotides associée à ?
e- ette technique est très sensible mais peu quantitative, j
/ / / J Mé,hodesdebi»logie Séculaire
1
J
f l
du taux de lésions. Unp nr eaCt}ori >y (PCR) peut aussi être utilisée pour la mesure ,
emiere technique consiste à cibler un fragment d’ADN