PESTICIDES ET PCB (EAU, SÉDIMENTS, ORGANISMES)
8.2.2. Purification
Les extraits concentrés sont purifiés sur Florisil désactivé, de la même
manière que pour l’eau (§ 8.1.2).
Une fois l’extrait déposé en tête de colonne, l’élution se fait :
— par 8 ml d hexane, lorsque 1 extrait contient des impuretés donnant
une coloration jaunâtre ;
— par un mélange plus polaire, contenant 10 à 20 % d’éther éthylique,
lorsque l’extrait est incolore.
L’éluat est concentré à 2 ml sous jet d’air ou d’azote purifiés. Puis on ajoute
0,5 à 1 ml de mercure pour précipiter les composés soufrés co-extraits. L'extrait
organique ainsi purifié et concentré est prêt pour l’analyse chromatographique.
Remarque : Comme dans le cas de l’eau, il est recommandé de tester les rendements de purification (§ 8.1.2).
8.3. LES ORGANISMES
• 8.3.1. Extraction
• Peser précisément un poids P de tissu sec (environ 10 g).
• Extraire par 50 ml d’hexane pendant 15 min, à l’aide d’un homogénéiseur de type virtis.
• Renouveler une seconde fois cette opération.
• Rassembler les deux extraits organiques et les centrifuger à 20003000 tr.min-1.
• Concentrer la phase organique à environ 5 ml à l'aide d'un évaporateur
rotatif.
8.3.2. Purification
La phase de purification consiste à éliminer les lipides et autres matières
organiques co-extraites de l’échantillon.
Selon les composés recherchés on utilise des méthodes différentes.
La purification par méthode destructrice est rapide mais n'est applicable
que pour la recherche des composés : HCH, DDT et métabolites, PCB ;
par contre, ce traitement acide détruit la dieldrine et l'endrine.
• Précipiter les graisses par addition de 1 à 2 ml d'acide sulfurique concentré.
• Agiter les deux phases.
• Centrifuger à 3000 tr.min-1 pendant 10 min, pour séparer les phases.
L’extrait d’hexane purifié est prêt pour l'analyse chromatographique.
La purification par adsorption sur alumine permet la recherche de; la
dieldrine et l’endrine, selon la méthode décrite par Holden et Marsden (196 ).
• Evaporer à 1 ml dans un tube gradué sous courant d air purifié une partie
aliquote de l’extrait organique ne contenant pas plus de 201 mg e
lipides.
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8.2.2. Purification
Les extraits concentrés sont purifiés sur Florisil désactivé, de la même
manière que pour l’eau (§ 8.1.2).
Une fois l’extrait déposé en tête de colonne, l’élution se fait :
— par 8 ml d hexane, lorsque 1 extrait contient des impuretés donnant
une coloration jaunâtre ;
— par un mélange plus polaire, contenant 10 à 20 % d’éther éthylique,
lorsque l’extrait est incolore.
L’éluat est concentré à 2 ml sous jet d’air ou d’azote purifiés. Puis on ajoute
0,5 à 1 ml de mercure pour précipiter les composés soufrés co-extraits. L'extrait
organique ainsi purifié et concentré est prêt pour l’analyse chromatographique.
Remarque : Comme dans le cas de l’eau, il est recommandé de tester les rendements de purification (§ 8.1.2).
8.3. LES ORGANISMES
• 8.3.1. Extraction
• Peser précisément un poids P de tissu sec (environ 10 g).
• Extraire par 50 ml d’hexane pendant 15 min, à l’aide d’un homogénéiseur de type virtis.
• Renouveler une seconde fois cette opération.
• Rassembler les deux extraits organiques et les centrifuger à 20003000 tr.min-1.
• Concentrer la phase organique à environ 5 ml à l'aide d'un évaporateur
rotatif.
8.3.2. Purification
La phase de purification consiste à éliminer les lipides et autres matières
organiques co-extraites de l’échantillon.
Selon les composés recherchés on utilise des méthodes différentes.
La purification par méthode destructrice est rapide mais n'est applicable
que pour la recherche des composés : HCH, DDT et métabolites, PCB ;
par contre, ce traitement acide détruit la dieldrine et l'endrine.
• Précipiter les graisses par addition de 1 à 2 ml d'acide sulfurique concentré.
• Agiter les deux phases.
• Centrifuger à 3000 tr.min-1 pendant 10 min, pour séparer les phases.
L’extrait d’hexane purifié est prêt pour l'analyse chromatographique.
La purification par adsorption sur alumine permet la recherche de; la
dieldrine et l’endrine, selon la méthode décrite par Holden et Marsden (196 ).
• Evaporer à 1 ml dans un tube gradué sous courant d air purifié une partie
aliquote de l’extrait organique ne contenant pas plus de 201 mg e
lipides.
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