POLLUANTS ORGANIQUES
• Recueillir l'éluat dans un tube à centrifugation et le concentrer à 0,5 ml
sous jet d'air ou d’azote purifiés.
L'extrait organique ainsi purifié et concentré est prêt pour l’analyse
chromatographique.
Remarques : Il est important de s'assurer du rendement de la purification (risques
de pertes de certains composés) et de son efficacité (présence de composés parasites
non éliminés) qui dépendent de la qualité de l’adsorbant utilisé. On peut tester le rendement à l'aide d'étalons selon le protocole appliqué aux extraits à purifier et, le cas
échéant, modifier les proportions du mélange hexane/éther éthylique pour ajuster sa
polarité. En cas de pics de composés non identifiés observés sur les chromatogrammes,
on peut tenter de les éliminer en ajoutant à l’extrait avant injection dans le chromatographe 0.4 à 0.5 ml de mercure métallique.
8.2. LES SÉDIMENTS
Préalablement aux opérations d’extraction et de purification on doit
éliminer l'eau interstitielle du sédiment. La lyophilisation (24 h) est recommandée car elle facilite la désagrégation ultérieure de l’échantillon, mais il convient
de s’assurer qu'il n’y a pas de risque de contamination par la pompe (retours
d'huile). Sinon on procédera au séchage du sédiment à l’étuve à 50 °C pendant 48 h.
Le sédiment désagrégé est tamisé à 1 mm pour éviter une trop grande
hétérogénéité de l'échantillon.
8.2.1. Extraction
Une méthode de référence comportant une double extraction au Soxhlet
a été précédemment décrite (rno, 1977). Elle consiste à extraire le sédiment
humide ou séché par l’acétonitrile pendant un minimum de 16 h; la phase
acétonitrile, diluée par 5 volumes d’eau, est extraite par de l’hexane. L’autre
méthode par extraction unique à l’hexane du sédiment sec, dans un Soxhlet,
conduit à un rendement inférieur. Dans les deux cas, l’utilisation du Soxhlet
peut être source de contaminations par la cartouche d’extraction.
La méthode actuellement préconisée, plus rapide, est basée sur une
extraction aux ultra-sons.
• Peser précisément un poids P de sédiment sec tamisé (15 à 25 g) et les
introduire dans un erlenmeyer de 150 ml.
• Ajouter 100 ml d'hexane.
• Placer l’erlenmeyer sous agitation magnétique, y plonger la sonde à
ultra-sons et laisser agir pendant 20 min.
• Faire une seconde extraction de la même façon avec également 100 ml
du solvant.
• Rassembler les deux extraits et les centrifuger.
• Concentrer à 1 ml comme pour l’eau de mer (§ 8.1.1).
Remarque : En cas d’extraction insuffisante à l’hexane, par les ultrasons, par
rapport à la méthode à l’acétonitrile (rno, 1977), on peut utiliser le mélange cyclohexane acétone (90 10). solvants qui présentent en outre une moindre toxicité.
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• Recueillir l'éluat dans un tube à centrifugation et le concentrer à 0,5 ml
sous jet d'air ou d’azote purifiés.
L'extrait organique ainsi purifié et concentré est prêt pour l’analyse
chromatographique.
Remarques : Il est important de s'assurer du rendement de la purification (risques
de pertes de certains composés) et de son efficacité (présence de composés parasites
non éliminés) qui dépendent de la qualité de l’adsorbant utilisé. On peut tester le rendement à l'aide d'étalons selon le protocole appliqué aux extraits à purifier et, le cas
échéant, modifier les proportions du mélange hexane/éther éthylique pour ajuster sa
polarité. En cas de pics de composés non identifiés observés sur les chromatogrammes,
on peut tenter de les éliminer en ajoutant à l’extrait avant injection dans le chromatographe 0.4 à 0.5 ml de mercure métallique.
8.2. LES SÉDIMENTS
Préalablement aux opérations d’extraction et de purification on doit
éliminer l'eau interstitielle du sédiment. La lyophilisation (24 h) est recommandée car elle facilite la désagrégation ultérieure de l’échantillon, mais il convient
de s’assurer qu'il n’y a pas de risque de contamination par la pompe (retours
d'huile). Sinon on procédera au séchage du sédiment à l’étuve à 50 °C pendant 48 h.
Le sédiment désagrégé est tamisé à 1 mm pour éviter une trop grande
hétérogénéité de l'échantillon.
8.2.1. Extraction
Une méthode de référence comportant une double extraction au Soxhlet
a été précédemment décrite (rno, 1977). Elle consiste à extraire le sédiment
humide ou séché par l’acétonitrile pendant un minimum de 16 h; la phase
acétonitrile, diluée par 5 volumes d’eau, est extraite par de l’hexane. L’autre
méthode par extraction unique à l’hexane du sédiment sec, dans un Soxhlet,
conduit à un rendement inférieur. Dans les deux cas, l’utilisation du Soxhlet
peut être source de contaminations par la cartouche d’extraction.
La méthode actuellement préconisée, plus rapide, est basée sur une
extraction aux ultra-sons.
• Peser précisément un poids P de sédiment sec tamisé (15 à 25 g) et les
introduire dans un erlenmeyer de 150 ml.
• Ajouter 100 ml d'hexane.
• Placer l’erlenmeyer sous agitation magnétique, y plonger la sonde à
ultra-sons et laisser agir pendant 20 min.
• Faire une seconde extraction de la même façon avec également 100 ml
du solvant.
• Rassembler les deux extraits et les centrifuger.
• Concentrer à 1 ml comme pour l’eau de mer (§ 8.1.1).
Remarque : En cas d’extraction insuffisante à l’hexane, par les ultrasons, par
rapport à la méthode à l’acétonitrile (rno, 1977), on peut utiliser le mélange cyclohexane acétone (90 10). solvants qui présentent en outre une moindre toxicité.
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