HYDROCARBURES-CPG-CLHP (ORGANISMES)
• Eluer la fraction aliphatique ALI par 15 ml d’hexane puis par 5 ml du
mélange dichlorométhane/hexane (1/4).
• Eluer la fraction aromatique A RO par 25 ml du mélange dichlorométhane/hexane (2/3).
• Evaporer à sec sous vide à 30 °C chacune des fractions ALI et ARO.
• Reprendre chaque fraction par de l’hexane, selon les indications des
paragraphes 5.4.1 et 5.5.2, et les transférer dans des tubes à bouchons
vissés à joints de téflon.
5.4. ANALYSE PAR CPG DE LA FRACTION ALIPHATIQUE
5.4.1. Quantification de la fraction aliphatique
Les conditions opératoires sont les suivantes :
— Injecteur : température 250°C; débit septum 20 ml.min-1.
— Colonne : pression du gaz vecteur (hydrogène ultra-pur) 1,4 bar ;
débit 2 ml.min~L
—
Four : température d’injection 40 °C.
L’injection est réalisée selon le mode « splitless ». Dès l’apparition du
pic du solvant, la température de la colonne est portée à 115 °C puis progressivement à 280°C à raison de 4°C.min-1.
La fraction aliphatique ALI est reprise par 100 pl d’hexane contenant
du pyrène comme étalon interne secondaire (le volume peut être différent
en fonction du niveau de pollution). On injecte 2 pl de cette solution qui est
analysée dans les conditions décrites ci-dessus.
Pour permettre à la fois l’identification et la quantification, une gamme
étalon est régulièrement analysée. Elle contient 10 à 12mg.l-1 des alcanes
du C15 (pentadécane) au C32 (dotriacontane) additionnés des étalons internes
pyrène et C24D50. Les facteurs de réponse kn de chacun des hydrocarbures
sont calculés par référence aux étalons internes.
A l’aide d’un intégrateur, on mesure les surfaces des pics chromatographiques et de l’enveloppe chromatographique. La quantification est réalisée
selon les formules ci-après en admettant pour l’enveloppe chromatographique
un facteur de réponse moyen km :
Sn
t—t
1
\n) = kn x — X El x
°E1
1
OU
Sm
1
\m) = km X — X El X p
ÔEI
1
avec :
.
X(n) : quantité de l’hydrocarbure n présent dans 1 échantillon.
•
\m) ■ quantité d’hydrocarbure présent dans 1 enveloppe non
résolue ;
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• Eluer la fraction aliphatique ALI par 15 ml d’hexane puis par 5 ml du
mélange dichlorométhane/hexane (1/4).
• Eluer la fraction aromatique A RO par 25 ml du mélange dichlorométhane/hexane (2/3).
• Evaporer à sec sous vide à 30 °C chacune des fractions ALI et ARO.
• Reprendre chaque fraction par de l’hexane, selon les indications des
paragraphes 5.4.1 et 5.5.2, et les transférer dans des tubes à bouchons
vissés à joints de téflon.
5.4. ANALYSE PAR CPG DE LA FRACTION ALIPHATIQUE
5.4.1. Quantification de la fraction aliphatique
Les conditions opératoires sont les suivantes :
— Injecteur : température 250°C; débit septum 20 ml.min-1.
— Colonne : pression du gaz vecteur (hydrogène ultra-pur) 1,4 bar ;
débit 2 ml.min~L
—
Four : température d’injection 40 °C.
L’injection est réalisée selon le mode « splitless ». Dès l’apparition du
pic du solvant, la température de la colonne est portée à 115 °C puis progressivement à 280°C à raison de 4°C.min-1.
La fraction aliphatique ALI est reprise par 100 pl d’hexane contenant
du pyrène comme étalon interne secondaire (le volume peut être différent
en fonction du niveau de pollution). On injecte 2 pl de cette solution qui est
analysée dans les conditions décrites ci-dessus.
Pour permettre à la fois l’identification et la quantification, une gamme
étalon est régulièrement analysée. Elle contient 10 à 12mg.l-1 des alcanes
du C15 (pentadécane) au C32 (dotriacontane) additionnés des étalons internes
pyrène et C24D50. Les facteurs de réponse kn de chacun des hydrocarbures
sont calculés par référence aux étalons internes.
A l’aide d’un intégrateur, on mesure les surfaces des pics chromatographiques et de l’enveloppe chromatographique. La quantification est réalisée
selon les formules ci-après en admettant pour l’enveloppe chromatographique
un facteur de réponse moyen km :
Sn
t—t
1
\n) = kn x — X El x
°E1
1
OU
Sm
1
\m) = km X — X El X p
ÔEI
1
avec :
.
X(n) : quantité de l’hydrocarbure n présent dans 1 échantillon.
•
\m) ■ quantité d’hydrocarbure présent dans 1 enveloppe non
résolue ;
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