HYDROCARBURES-CPG-CLHP (ORGANISMES)
— Dispositif de filtration des solvants (exemple : millipore).
— Dispositif de dégazage du solvant par bullage d’hélium.
— Intégrateur-calculateur-enregistreur de grande capacité et à modes
d’intégration divers (exemple : SP-4100, spectra-physics).
4. RÉACTIFS
4.1. SOLVANTS ORGANIQUES
On utilise les solvants suivants : acétone, hexane, dichlorométhane,
pentane, de qualité Pestipur (sds) ou équivalent ; heptane de qualité Chromasol (sds).
4.2. ADSORBANTS
— Florisil : adsorbant 100-200 mesh (touzart & Matignon). Avant
utilisation, il est purifié à 600 °C pendant 12 h, puis activé à 150°C pendant
une nuit, enfin porté à un degré d’activité standard par addition de 5 % d’eau.
— Silicagel type 60, 70-230 mesh (merck), purifié une nuit à 250 °C.
Avant utilisation, il est activé une nuit à 150°C.
4.3. HYDROCARBURES ÉTALONS
Les hydrocarbures étalons sont d’origines commerciales diverses :
fluka, ega chemie, analabs, nanogens. Ils sont utilisés en solution dans
l’hexane.
4.4. ÉTALONS INTERNES
Les étalons internes pour la CPG sont le tétracosane C24Hj0, le tétracosane perdeutérié C24D50 (prochem), le pyrène naturel et le pyrène perdeutérié C16D10 (prochem). Ils sont préparés en solution dans fhexane à des
concentrations de 15 mg.l-1.
Pour la CLHP, l’étalon interne utilisé est le chrysène deutérié C18D12
(prochem) à la concentration de 4,6 mg.U 1 dans l’hexane.
5. MODE OPÉRATOIRE
5.1. EXTRACTION
Après décongélation, les tissus sont broyés, homogénéisés et lyophilisés
(chapitre I).
• Peser exactement une quantité d’échantillon lyophilisé d environ 10 g.
• Extraire une première fois par 100 ml, puis deux fois par 50 ml du mélange
hexane/acétone (4/1) dans des ampoules à décanter.
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— Dispositif de filtration des solvants (exemple : millipore).
— Dispositif de dégazage du solvant par bullage d’hélium.
— Intégrateur-calculateur-enregistreur de grande capacité et à modes
d’intégration divers (exemple : SP-4100, spectra-physics).
4. RÉACTIFS
4.1. SOLVANTS ORGANIQUES
On utilise les solvants suivants : acétone, hexane, dichlorométhane,
pentane, de qualité Pestipur (sds) ou équivalent ; heptane de qualité Chromasol (sds).
4.2. ADSORBANTS
— Florisil : adsorbant 100-200 mesh (touzart & Matignon). Avant
utilisation, il est purifié à 600 °C pendant 12 h, puis activé à 150°C pendant
une nuit, enfin porté à un degré d’activité standard par addition de 5 % d’eau.
— Silicagel type 60, 70-230 mesh (merck), purifié une nuit à 250 °C.
Avant utilisation, il est activé une nuit à 150°C.
4.3. HYDROCARBURES ÉTALONS
Les hydrocarbures étalons sont d’origines commerciales diverses :
fluka, ega chemie, analabs, nanogens. Ils sont utilisés en solution dans
l’hexane.
4.4. ÉTALONS INTERNES
Les étalons internes pour la CPG sont le tétracosane C24Hj0, le tétracosane perdeutérié C24D50 (prochem), le pyrène naturel et le pyrène perdeutérié C16D10 (prochem). Ils sont préparés en solution dans fhexane à des
concentrations de 15 mg.l-1.
Pour la CLHP, l’étalon interne utilisé est le chrysène deutérié C18D12
(prochem) à la concentration de 4,6 mg.U 1 dans l’hexane.
5. MODE OPÉRATOIRE
5.1. EXTRACTION
Après décongélation, les tissus sont broyés, homogénéisés et lyophilisés
(chapitre I).
• Peser exactement une quantité d’échantillon lyophilisé d environ 10 g.
• Extraire une première fois par 100 ml, puis deux fois par 50 ml du mélange
hexane/acétone (4/1) dans des ampoules à décanter.
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