POLLUANTS ORGANIQUES
milliers d’isomères) constituent la plus grande partie de la contamination.
La chromatographie liquide est tout à fait insuffisante pour les séparer convenablement, mais elle permet de distinguer les hydrocarbures aromatiques
par familles contenant de 1 à 5 cycles aromatiques élués dans cet ordre en
CLHP.
Dans le présent mode opératoire, la séparation chromatographique est
obtenue sur colonne de silice par une élution isocratique. Cette élution sans
gradient de concentration s’effectue par l’hexane additionné de 0,5 % d’acétonitrile.
Le détecteur est un spectrofluorimètre, appareil qui répond à la quasitotalité des hydrocarbures polycycliques. La longueur d’onde d’excitation
est fixée à 270 nm à l’aide d’un monochromateur. Les longueurs d’onde
d'émission sont sélectionnées à l’aide d’un filtre à 310 nm qui conserve la
totalité du spectre au-dessus de cette longueur d’onde. On notera que, par
rapport aux valeurs recommandées par I’unesco (1977) : excitation à 310 nm,
émission à 360 nm, ce système permet d’améliorer très nettement la sensibilité
notamment pour les hydrocarbures possédant 2 et 3 cycles aromatiques.
On utilise comme produit de référence le chrysène, de composition parfaitement définie, qui répond convenablement en fluorescence. La quantification est réalisée par intégration des surfaces des pics chromatographiques
en comparant les surfaces obtenues pour un échantillon et pour un pic de
chrysène. Le facteur de réponse des hydrocarbures aromatiques par rapport au
chrysène est différent pour chacun d’eux. Si l’on quantifiait certains hydrocarbures particuliers, on serait contraint d’en tenir compte. Dans le cas présent, il s'agit de quantifier une mixture contenant des centaines, voire des
milliers d’hydrocarbures, et il est donc raisonnable d’appliquer un coefficient
de réponse unique ayant valeur statistique et indépendant de l’échantillon
à analyser. L'expérience montre qu’un facteur de réponse égal à 1 par rapport
au chrysène donne des résultats acceptables.
2.
DOMAINE D’APPLICATION
La méthode décrite est conçue pour s’appliquer à la mesure des hydrocarbures aromatiques dans les organismes vivants.
La gamme de concentrations linéaire s’étend de 0 à 50 mg.kg-1. Cette
échelle ne peut pas être transposée directement d’un laboratoire à un autre,
et il convient de s'assurer de la linéarité en fonction de l’appareillage utilisé.
Pour des échantillons qui, du fait de leur forte contamination, se situent hors
de la gamme de linéarité, on effectuera les dilutions adéquates.
__ La limite de détection est inférieure à 1 mg.kg-1 : la méthode est donc
utilisable pour contrôler le niveau de contamination chronique des coquillages
en zone littorale, indépendamment de tout événement particulier (rejet accidentel)/ ’
Cette méthode est applicable à l'analyse des sédiments, en adaptant le
poids de 1 échantillon au degré de contamination présumé.
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milliers d’isomères) constituent la plus grande partie de la contamination.
La chromatographie liquide est tout à fait insuffisante pour les séparer convenablement, mais elle permet de distinguer les hydrocarbures aromatiques
par familles contenant de 1 à 5 cycles aromatiques élués dans cet ordre en
CLHP.
Dans le présent mode opératoire, la séparation chromatographique est
obtenue sur colonne de silice par une élution isocratique. Cette élution sans
gradient de concentration s’effectue par l’hexane additionné de 0,5 % d’acétonitrile.
Le détecteur est un spectrofluorimètre, appareil qui répond à la quasitotalité des hydrocarbures polycycliques. La longueur d’onde d’excitation
est fixée à 270 nm à l’aide d’un monochromateur. Les longueurs d’onde
d'émission sont sélectionnées à l’aide d’un filtre à 310 nm qui conserve la
totalité du spectre au-dessus de cette longueur d’onde. On notera que, par
rapport aux valeurs recommandées par I’unesco (1977) : excitation à 310 nm,
émission à 360 nm, ce système permet d’améliorer très nettement la sensibilité
notamment pour les hydrocarbures possédant 2 et 3 cycles aromatiques.
On utilise comme produit de référence le chrysène, de composition parfaitement définie, qui répond convenablement en fluorescence. La quantification est réalisée par intégration des surfaces des pics chromatographiques
en comparant les surfaces obtenues pour un échantillon et pour un pic de
chrysène. Le facteur de réponse des hydrocarbures aromatiques par rapport au
chrysène est différent pour chacun d’eux. Si l’on quantifiait certains hydrocarbures particuliers, on serait contraint d’en tenir compte. Dans le cas présent, il s'agit de quantifier une mixture contenant des centaines, voire des
milliers d’hydrocarbures, et il est donc raisonnable d’appliquer un coefficient
de réponse unique ayant valeur statistique et indépendant de l’échantillon
à analyser. L'expérience montre qu’un facteur de réponse égal à 1 par rapport
au chrysène donne des résultats acceptables.
2.
DOMAINE D’APPLICATION
La méthode décrite est conçue pour s’appliquer à la mesure des hydrocarbures aromatiques dans les organismes vivants.
La gamme de concentrations linéaire s’étend de 0 à 50 mg.kg-1. Cette
échelle ne peut pas être transposée directement d’un laboratoire à un autre,
et il convient de s'assurer de la linéarité en fonction de l’appareillage utilisé.
Pour des échantillons qui, du fait de leur forte contamination, se situent hors
de la gamme de linéarité, on effectuera les dilutions adéquates.
__ La limite de détection est inférieure à 1 mg.kg-1 : la méthode est donc
utilisable pour contrôler le niveau de contamination chronique des coquillages
en zone littorale, indépendamment de tout événement particulier (rejet accidentel)/ ’
Cette méthode est applicable à l'analyse des sédiments, en adaptant le
poids de 1 échantillon au degré de contamination présumé.
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