MATÉRIEL PARTICULAIRE
• Faire une gamme de dilution qui se situe dans la zone de linéarité entre
fluorescence et concentration, et procéder comme au paragraphe 7.4.1
(détermination des constantes de calibration).
7.4.3. Etalonnage à partir de chlorophylle a purifiée par chromatographie
• Purifier le pigment et contrôler la pureté selon le procédé décrit au paragraphe 9.
• Réaliser l’étalonnage comme avec la chlorophylle a du commerce (§7.4.2).
8. CALCUL DES CONCENTRATIONS EN CHLOROPHYLLE A ET
PHÉOPIGMENTS
Les concentrations en chlorophylle a et phéophytine a sont données par
les équations de Lorenzen (1966) :
[Chlorophylle a] (mg.m 3) = Kx x
[Phéophytine a] (mg.m 3) = Kx
Fo max
Fa
^-1
Fa
Fo
— max - 1
Fa
rFo — max
Fa
fe-1
1
F°
I
Fa
v
1000 x V
v
1000 x V
x 0,975
avec :
Fo
• p- max ■ rapport d'acidification de la chlorophylle a pour l’appareillage donné,
. Fo
: fluorescence de l’échantillon avant acidification,
• Fa
: fluorescence de l’échantillon après acidification,
• '
: volume de l'extrait acétonique (millilitres),
• V
: volume de l’eau de mer filtrée (litres),
• Kx
: constante de calibration pour une fente donnée du fluorimètre,
. 0.975 . rapport des poids moléculaires phéophytine a/chlorophylle#Cette correction est inutile si l’on considère non pas le poids
réel de la phéophytine mais une équivalence en chlorophylle#
dégradée.
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