MATÉRIEL PARTICULAIRE
6.3. SOLUTION D’ACIDE CHLORHYDRIQUE 0,3 mol.1 1
Diluer 40 fois de l’acide chlorhydrique concentré (d x 1,18) dans de
l’eau distillée, soit 2,5 ml d’acide pour 100 ml de solution.
7. MODE OPÉRATOIRE
7.1. FILTRATION
L'eau doit être filtrée le plus rapidement possible après le prélèvement.
Utiliser de préférence-les membranes de filtration en fibre de verre de type
whatman GF/C qui retiennent les particules de taille supérieure à 0,5-1 pm»
et qui offrent plusieurs avantages (§ 1.1). On peut également utiliser les
membranes en esters de cellulose de type millipore HA (0,45 pm) ou AA
(0,8 pm) mais elles donnent des blancs plus élevés.
• Placer une membrane sur le support et y déposer 1 à 2 ml de suspension
de carbonate de magnésium.
• Appliquer le vide et filtrer l’échantillon en prenant soin de l’agiter pour
bien récupérer toutes les particules ; pour éviter le risque d’éclatement
des cellules, on ne créera pas un vide supérieur à 1/2 bar : la pression
résiduelle sous le filtre doit donc rester supérieure à 1/2 bar.
• Rincer le cas échéant la tulipe du support-filtre avec un peu d'eau de mer
fraîchement filtrée, pour rassembler toutes les particules sur le filtre.
• Laisser fluer l’air quelques instants pour éliminer l’eau du filtre.
• Mettre le filtre dans le tube prévu à cet usage et si possible commencer
l’extraction (§ 7.2).
• Placer aussitôt le filtre ou l’extrait à l’abri de la lumière, et au froid si
l’analyse est différée (§ 4).
7.2. EXTRACTION DES PIGMENTS
Le filtre et l'extrait pigmentaire ne doivent jamais rester à la lumière :
a cet effet il est bon d’envelopper les tubes dans une feuille d’aluminium.
• Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml du solvant
d extraction (acétone à 90 % ou méthanol, selon la méthode utilisée).
• Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre à
embout coupant, boucher et agiter pour disperser les fibres.
• Laisser 1 extraction se poursuivre, soit une vingtaine d’heures au réfrigérateur dans 1 acétone à 90
soit 1 h à température ambiante dans
le méthanol (a).
( ) Si 1 on utilise un broyeur ou un désintégrateur à ultra-sons, le temps d'extraction peut être
réduit a quelques minutes, quel que soit le solvant. Le broyage est effectué pendant une minute
avec quelques millihtres de solvant. Deux fractions de quelques millilitres sont également utilisées
pour rincer le broyeur et transférer tous les pigments dans le tube à centrifuger. Après 5 à 10 min
de repos, la centrifugation est effectuée comme décrit ci-dessus.
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6.3. SOLUTION D’ACIDE CHLORHYDRIQUE 0,3 mol.1 1
Diluer 40 fois de l’acide chlorhydrique concentré (d x 1,18) dans de
l’eau distillée, soit 2,5 ml d’acide pour 100 ml de solution.
7. MODE OPÉRATOIRE
7.1. FILTRATION
L'eau doit être filtrée le plus rapidement possible après le prélèvement.
Utiliser de préférence-les membranes de filtration en fibre de verre de type
whatman GF/C qui retiennent les particules de taille supérieure à 0,5-1 pm»
et qui offrent plusieurs avantages (§ 1.1). On peut également utiliser les
membranes en esters de cellulose de type millipore HA (0,45 pm) ou AA
(0,8 pm) mais elles donnent des blancs plus élevés.
• Placer une membrane sur le support et y déposer 1 à 2 ml de suspension
de carbonate de magnésium.
• Appliquer le vide et filtrer l’échantillon en prenant soin de l’agiter pour
bien récupérer toutes les particules ; pour éviter le risque d’éclatement
des cellules, on ne créera pas un vide supérieur à 1/2 bar : la pression
résiduelle sous le filtre doit donc rester supérieure à 1/2 bar.
• Rincer le cas échéant la tulipe du support-filtre avec un peu d'eau de mer
fraîchement filtrée, pour rassembler toutes les particules sur le filtre.
• Laisser fluer l’air quelques instants pour éliminer l’eau du filtre.
• Mettre le filtre dans le tube prévu à cet usage et si possible commencer
l’extraction (§ 7.2).
• Placer aussitôt le filtre ou l’extrait à l’abri de la lumière, et au froid si
l’analyse est différée (§ 4).
7.2. EXTRACTION DES PIGMENTS
Le filtre et l'extrait pigmentaire ne doivent jamais rester à la lumière :
a cet effet il est bon d’envelopper les tubes dans une feuille d’aluminium.
• Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml du solvant
d extraction (acétone à 90 % ou méthanol, selon la méthode utilisée).
• Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre à
embout coupant, boucher et agiter pour disperser les fibres.
• Laisser 1 extraction se poursuivre, soit une vingtaine d’heures au réfrigérateur dans 1 acétone à 90
soit 1 h à température ambiante dans
le méthanol (a).
( ) Si 1 on utilise un broyeur ou un désintégrateur à ultra-sons, le temps d'extraction peut être
réduit a quelques minutes, quel que soit le solvant. Le broyage est effectué pendant une minute
avec quelques millihtres de solvant. Deux fractions de quelques millilitres sont également utilisées
pour rincer le broyeur et transférer tous les pigments dans le tube à centrifuger. Après 5 à 10 min
de repos, la centrifugation est effectuée comme décrit ci-dessus.
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