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Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
— prendre une éprouvette graduée de 100 mL stérilisée , percer le pôle opposé
de l’œuf, correspondant à la chambre à air, puis placer celui-ci au-dessus de
l'éprouvette graduée (pôle de la chambre à air vers le haut). À 1 aide d une
pipette Pasteur stérile munie d’une poire en caoutchouc, faire écouler le jaune
dans l’éprouvette ;
- ajouter en général un volume d'eau physiologique stérile (à 8,5 % égale à celui du jaune d'œuf et mélanger avec un agitateur stérile ; dans le cas de
la gélose de Baird-Parker, il est recommandé de diluer 15 mL de jaune d'œuf
dans 35 mL d'eau physiologique ;
- vérifier la stérilité de l'émulsion préparée en l’ensemençant sur un bouillon
nutritif, qui sera incubé à 37 °C et observé pendant au moins trois jours.
Le jaune d'œuf intervient surtout dans la composition de quelques milieux de
culture dont :
- la gélose de Baird-Parker bio-Mérieux" SA pour le dénombrement avec
confirmation des staphylocoques à coagulase positive dans les aliments
(cf deuxième partie, chapitre 9 « Staphylococcus, Micrococcus et exMicrococcus », paragraphe 5.2.1.) ;
l'agar sélectif pour la culture du Bacillus cereus selon Mossel VWR™ International (Merck) pour la détection, l'isolement et le dénombrement de B. cereus
(cf. deuxième partie, chapitre 2 « Bacillus et ex-Bacillus », paragraphe 5) ;
la gélose au jaune d'œuf pour la détection d’enzymes spécifiques fabriquées
par certaines bactéries (Pseudomonas. Bacillus...), capables de dégrader le jaune
d œuf (cf. première partie, chapitre 5, « Milieux de culture et tests biochimiques
pour l'identification bactérienne », paragraphe 4). Elle est préparée en ajoutant
2 mL d une émulsion de jaune d'œuf et d'eau physiologique à 0,85 % stérile à
20 mL de gélose nutritive, fondue et ramenée à 47 ± 2 °C ; couler dans des boîtes
de Petri et laisser solidifier.
► Bile de bœuf
Cf. supra, paragraphe 2.1.1.5. et infra, tableau 22 A.
► Extraits de viande : cf. supra, paragraphe 2.1.1.1.
► Peptones de viande : cf supra, paragraphe 2.1.1.2.
Les extraits de \iande et les peptones de viande entrent dans la composition
des milieux de culture de base pour bactéries, mais aussi des milieux d’isolement
et d identification. Pour les premiers, il s’agit des bouillons nutritifs et des gélose s nutritives qui conviennent a la culture de nombreuses bactéries peu exigeantes en nutriments (cf. infra, paragraphe 4.1.).
2.4.2. Milieux synthétiques
r ' m.’** . e.ux de cultures composés de solutions de substances chimi1. S1
C CaU d,stdlée. dont la composition est constante et strictement
Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
— prendre une éprouvette graduée de 100 mL stérilisée , percer le pôle opposé
de l’œuf, correspondant à la chambre à air, puis placer celui-ci au-dessus de
l'éprouvette graduée (pôle de la chambre à air vers le haut). À 1 aide d une
pipette Pasteur stérile munie d’une poire en caoutchouc, faire écouler le jaune
dans l’éprouvette ;
- ajouter en général un volume d'eau physiologique stérile (à 8,5 % égale à celui du jaune d'œuf et mélanger avec un agitateur stérile ; dans le cas de
la gélose de Baird-Parker, il est recommandé de diluer 15 mL de jaune d'œuf
dans 35 mL d'eau physiologique ;
- vérifier la stérilité de l'émulsion préparée en l’ensemençant sur un bouillon
nutritif, qui sera incubé à 37 °C et observé pendant au moins trois jours.
Le jaune d'œuf intervient surtout dans la composition de quelques milieux de
culture dont :
- la gélose de Baird-Parker bio-Mérieux" SA pour le dénombrement avec
confirmation des staphylocoques à coagulase positive dans les aliments
(cf deuxième partie, chapitre 9 « Staphylococcus, Micrococcus et exMicrococcus », paragraphe 5.2.1.) ;
l'agar sélectif pour la culture du Bacillus cereus selon Mossel VWR™ International (Merck) pour la détection, l'isolement et le dénombrement de B. cereus
(cf. deuxième partie, chapitre 2 « Bacillus et ex-Bacillus », paragraphe 5) ;
la gélose au jaune d'œuf pour la détection d’enzymes spécifiques fabriquées
par certaines bactéries (Pseudomonas. Bacillus...), capables de dégrader le jaune
d œuf (cf. première partie, chapitre 5, « Milieux de culture et tests biochimiques
pour l'identification bactérienne », paragraphe 4). Elle est préparée en ajoutant
2 mL d une émulsion de jaune d'œuf et d'eau physiologique à 0,85 % stérile à
20 mL de gélose nutritive, fondue et ramenée à 47 ± 2 °C ; couler dans des boîtes
de Petri et laisser solidifier.
► Bile de bœuf
Cf. supra, paragraphe 2.1.1.5. et infra, tableau 22 A.
► Extraits de viande : cf. supra, paragraphe 2.1.1.1.
► Peptones de viande : cf supra, paragraphe 2.1.1.2.
Les extraits de \iande et les peptones de viande entrent dans la composition
des milieux de culture de base pour bactéries, mais aussi des milieux d’isolement
et d identification. Pour les premiers, il s’agit des bouillons nutritifs et des gélose s nutritives qui conviennent a la culture de nombreuses bactéries peu exigeantes en nutriments (cf. infra, paragraphe 4.1.).
2.4.2. Milieux synthétiques
r ' m.’** . e.ux de cultures composés de solutions de substances chimi1. S1
C CaU d,stdlée. dont la composition est constante et strictement