Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture
57
La composition chimique type en g/L d’eau distillée de ce milieu est la
suivante :
Extrait de malt........................................................................................... 30
Peptone de soja .....................................................................................
3
Agar-agar.................................................................................................. 15
pH 5,5 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 121 °C pendant 10 minutes
Ensemencer par une méthode appropriée en fonction du but recherché.
Incuber en aérobiose jusqu’à 5 jours à 28 °C pour les moisissures et seulement
3 jours pour les levures.
D’après le contrôle qualité, les moisissures telles que Geotrichum candidum
DSMZ 1240, Pénicillium commune ATCC 10428, Aspergillus ni ger ATCC
16404... présentent une bonne à très bonne croissance sur ce milieu.
Pour un dénombrement des levures, ce milieu peut être ensemencé par la
méthode en spirale, comme le milieu précédent. Un contrôle de qualité est fourni
pour des souches de Candida albicans ATCC 10231. Saccharomyces cerevisiae
ATCC 9763 et 9080...
► Extrait de levures
Cf. supra, paragraphe 2.1.1.3.
Un extrait de levures est incorporé à de nombreux milieux de culture pour bactéries, qu’ils soient d'usage courant, d’isolement ou d'identification.
2.4.1.2. Les milieux d'origine animale
Lait, œuf, bile de bœuf, extraits de viande, peptones préparés à partir de
viande... peuvent, selon les cas, constituer des milieux de culture pour les microorganismes ou entrer dans la composition de ces milieux.
► Gélose au lait (en boîte de Petri)
Cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour
I identification bactérienne », paragraphe 3.1.3.
► Jaune d'œuf
Le jaune d'œuf (en émulsion) peut être acheté prêt à l'emploi ou préparé au
laboratoire en suivant le protocole ci-dessous :
- stériliser un point de la coquille de l'œuf près de la veilleuse d'un bec Bunsen, parallèlement à la surface de la coquille (à l'extrémité opposée de la chambre à air) ;
- casser la coquille au niveau du point carbonisé, puis faire un petit trou à
1 aide d'une pointe de compas flambée, par exemple. L'orifice doit permettre le
passage de l’effilure d'une pipette Pasteur stérile ;
- aspirer l’albumine de l’œuf en totalité en évitant de toucher le jaune et éliminer celle-ci ;
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La composition chimique type en g/L d’eau distillée de ce milieu est la
suivante :
Extrait de malt........................................................................................... 30
Peptone de soja .....................................................................................
3
Agar-agar.................................................................................................. 15
pH 5,5 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 121 °C pendant 10 minutes
Ensemencer par une méthode appropriée en fonction du but recherché.
Incuber en aérobiose jusqu’à 5 jours à 28 °C pour les moisissures et seulement
3 jours pour les levures.
D’après le contrôle qualité, les moisissures telles que Geotrichum candidum
DSMZ 1240, Pénicillium commune ATCC 10428, Aspergillus ni ger ATCC
16404... présentent une bonne à très bonne croissance sur ce milieu.
Pour un dénombrement des levures, ce milieu peut être ensemencé par la
méthode en spirale, comme le milieu précédent. Un contrôle de qualité est fourni
pour des souches de Candida albicans ATCC 10231. Saccharomyces cerevisiae
ATCC 9763 et 9080...
► Extrait de levures
Cf. supra, paragraphe 2.1.1.3.
Un extrait de levures est incorporé à de nombreux milieux de culture pour bactéries, qu’ils soient d'usage courant, d’isolement ou d'identification.
2.4.1.2. Les milieux d'origine animale
Lait, œuf, bile de bœuf, extraits de viande, peptones préparés à partir de
viande... peuvent, selon les cas, constituer des milieux de culture pour les microorganismes ou entrer dans la composition de ces milieux.
► Gélose au lait (en boîte de Petri)
Cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour
I identification bactérienne », paragraphe 3.1.3.
► Jaune d'œuf
Le jaune d'œuf (en émulsion) peut être acheté prêt à l'emploi ou préparé au
laboratoire en suivant le protocole ci-dessous :
- stériliser un point de la coquille de l'œuf près de la veilleuse d'un bec Bunsen, parallèlement à la surface de la coquille (à l'extrémité opposée de la chambre à air) ;
- casser la coquille au niveau du point carbonisé, puis faire un petit trou à
1 aide d'une pointe de compas flambée, par exemple. L'orifice doit permettre le
passage de l’effilure d'une pipette Pasteur stérile ;
- aspirer l’albumine de l’œuf en totalité en évitant de toucher le jaune et éliminer celle-ci ;