Table des matières
VII
Chapitre 4
Méthodes de travail en microbiologie
1. Techniques d’ensemencement des micro-organismes.........................
83
1.1. Travail sur paillasse avec des becs Bunsen de sécurité ............
83
1.2. Travail sous PSM ...........................................................................
86
1.3. Exemples d’ensemencement de micro-organismes ..................
86
2. Techniques d’isolement des bactéries...................................................
88
2.1. Préparation et ensemencement des milieux de culture en boîtes
de Petri ....................................................................................
, 88
2.2. Méthode des quadrants..................................................................
89
3. Dénombrement des micro-organismes...................................................
92
3.1. Technique générale des dilutions et applications.......................
92
3.2. Techniques de dénombrement .....................................................
94
4. Techniques d’observation des bactéries................................................
101
4.1. Examen macroscopique des bactéries..........................................
101
4.2. Examen microscopique des bactéries..........................................
105
4.3. Techniques de coloration ..............................................................
108
5. Contrôle d’hygiène des surfaces de travail..........................................
118
5.1. Problématique..................................................................................
118
5.2. Boîtes contact ..................................................................................
119
5.3. Lames gélosées ..............................................................................
122
Chapitre 5
Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
1. Milieux de culture et tests biochimiques du métabolisme respiratoire
126
1.1. Les quatre types respiratoires des bactéries ...............................
126
1.2. Recherche de la catalase - Test catalase......................................
'12&
1.3. Recherche de l’oxydase - Test oxydase......................................
129J
1.4. Recherche des nitrate-réductases (NR)........................................
130
1.5. Mesure de l’activité de la réductase microbienne - Application
132
2. Milieux de culture et tests biochimiques du catabolisme des glucides
133
2.1. Milieux de culture pour l'étude de la voie d’attaque des glucides
133
2.2. Milieux glucidiques pour bactéries fermentatives ....................
137
2.3. Milieux de culture pour la voie d'attaque de certains glucides .
147
2.4. Milieux de culture pour l'étude des dérivés de l'acide pyruvique
149
2.5. Milieu de culture pour l'utilisation du citrate de sodium ..........
152
3. Milieux de culture et tests biochimiques du catabolisme des protéines
154
3.1. Milieux de culture pour bactéries protéolytiques....................... I 154
3.2. Milieux de culture pour bactéries dégradant les acides aminés .
157
3.3. Milieux de culture pour les bactéries dégradant
des acides aminés particuliers................................................
164
3.4. Milieux de culture pour la dégradation de l’urée .........................
166
3.5. Milieux de culture mixtes ............................................................
167
4. Milieux de culture et tests biochimiques du catabolisme des lipides..
170
4.1. Estérases...........................................................................................
120
4.2. Lipases .............................................................................................
121
4.3. Lécithinases......................................................................................
122
VII
Chapitre 4
Méthodes de travail en microbiologie
1. Techniques d’ensemencement des micro-organismes.........................
83
1.1. Travail sur paillasse avec des becs Bunsen de sécurité ............
83
1.2. Travail sous PSM ...........................................................................
86
1.3. Exemples d’ensemencement de micro-organismes ..................
86
2. Techniques d’isolement des bactéries...................................................
88
2.1. Préparation et ensemencement des milieux de culture en boîtes
de Petri ....................................................................................
, 88
2.2. Méthode des quadrants..................................................................
89
3. Dénombrement des micro-organismes...................................................
92
3.1. Technique générale des dilutions et applications.......................
92
3.2. Techniques de dénombrement .....................................................
94
4. Techniques d’observation des bactéries................................................
101
4.1. Examen macroscopique des bactéries..........................................
101
4.2. Examen microscopique des bactéries..........................................
105
4.3. Techniques de coloration ..............................................................
108
5. Contrôle d’hygiène des surfaces de travail..........................................
118
5.1. Problématique..................................................................................
118
5.2. Boîtes contact ..................................................................................
119
5.3. Lames gélosées ..............................................................................
122
Chapitre 5
Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
1. Milieux de culture et tests biochimiques du métabolisme respiratoire
126
1.1. Les quatre types respiratoires des bactéries ...............................
126
1.2. Recherche de la catalase - Test catalase......................................
'12&
1.3. Recherche de l’oxydase - Test oxydase......................................
129J
1.4. Recherche des nitrate-réductases (NR)........................................
130
1.5. Mesure de l’activité de la réductase microbienne - Application
132
2. Milieux de culture et tests biochimiques du catabolisme des glucides
133
2.1. Milieux de culture pour l'étude de la voie d’attaque des glucides
133
2.2. Milieux glucidiques pour bactéries fermentatives ....................
137
2.3. Milieux de culture pour la voie d'attaque de certains glucides .
147
2.4. Milieux de culture pour l'étude des dérivés de l'acide pyruvique
149
2.5. Milieu de culture pour l'utilisation du citrate de sodium ..........
152
3. Milieux de culture et tests biochimiques du catabolisme des protéines
154
3.1. Milieux de culture pour bactéries protéolytiques....................... I 154
3.2. Milieux de culture pour bactéries dégradant les acides aminés .
157
3.3. Milieux de culture pour les bactéries dégradant
des acides aminés particuliers................................................
164
3.4. Milieux de culture pour la dégradation de l’urée .........................
166
3.5. Milieux de culture mixtes ............................................................
167
4. Milieux de culture et tests biochimiques du catabolisme des lipides..
170
4.1. Estérases...........................................................................................
120
4.2. Lipases .............................................................................................
121
4.3. Lécithinases......................................................................................
122