Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture
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3.1.3. Les conditions de stérilisation
Les conditions de stérilisation appliquées au matériel (récipients, milieux de
culture, substances chimiques diverses) sont présentées dans le tableau 17.
Tableau 17 ■ Conditions de stérilisation du matériel utilisé en routine.
Récipients, milieux...
à stériliser à l’autoclave
Température
°C
Pression bars
Temps
minutes
Verrerie borosilicaté propre et vide
120
1
20
Eau stérile
Eau physiologique à 8,5 %o (en NaCl)
120
1
20
Paraffine stérile
120
1
20
Sels minéraux
120
1
20
Milieux courants :
bouillon nutritif, gélose nutritive...
121
1
15
Lait écrémé
115
0,7
15
Milieux contenant des substances thermolabiles :
Glucides (glucose, lactose...)
110
0,5
20
Glucose en solution pure
110
0,5
20
Milieux déshydratés
Cf. indications données dans les fiches techniques des
milieux de culture des fabricants et dans les nombreux
exemples de cet ouvrage
3.1.4. Contrôle de la stérilisation
Le contrôle de l’efficacité d'une stérilisation à l'autoclave est surtout réalisé à
l'aide de témoins de stérilisation tels que des rubans indicateurs de stérilisation
vapeur de différents types suivant les fabricants (c/. annexe générale 8
« Quelques adresses utiles de sociétés commercialisant du matériel de
microbiologie ») :
- les « rubans indicateurs vapeur » (CML) sont des rubans présentés en rouleaux (comme des rouleaux de rubans adhésifs). Ils sont conçus selon trois paramètres (temps, température et vapeur saturée) ; les stries blanches du ruban virent
au noir lorsque la stérilisation est satisfaisante ;
- les « rubans témoin » de stérilisation à l'autoclave (Grosseron) sont semblables aux précédents et sont approuvés pour le contrôle de qualité en agroalimentaire (HACCP) ;
- les « adhésifs indicateur d'autoclavage » (Bioblock) qui laissent apparaître
les mots « autoclaved » ou « sterilized » après une stérilisation à l'autoclave à
121 °C pendant 15 minutes ;
- des « rubans indicateurs et de contrôle de stérilisation » à 121 °C et à 134 °C
changeant de couleur après exposition (marron clair ou marron foncé suivant la
durée d'exposition) [VWR™ International].
Il existe d’autres systèmes de contrôle de la stérilisation : pastilles indicatrices
de stérilisation à l'autoclave virant du bleu au rose après exposition à 121 °C penS dant 10 minutes (VWR™ International)...
- La
photocopie non
autonsée
est un
délit
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3.1.3. Les conditions de stérilisation
Les conditions de stérilisation appliquées au matériel (récipients, milieux de
culture, substances chimiques diverses) sont présentées dans le tableau 17.
Tableau 17 ■ Conditions de stérilisation du matériel utilisé en routine.
Récipients, milieux...
à stériliser à l’autoclave
Température
°C
Pression bars
Temps
minutes
Verrerie borosilicaté propre et vide
120
1
20
Eau stérile
Eau physiologique à 8,5 %o (en NaCl)
120
1
20
Paraffine stérile
120
1
20
Sels minéraux
120
1
20
Milieux courants :
bouillon nutritif, gélose nutritive...
121
1
15
Lait écrémé
115
0,7
15
Milieux contenant des substances thermolabiles :
Glucides (glucose, lactose...)
110
0,5
20
Glucose en solution pure
110
0,5
20
Milieux déshydratés
Cf. indications données dans les fiches techniques des
milieux de culture des fabricants et dans les nombreux
exemples de cet ouvrage
3.1.4. Contrôle de la stérilisation
Le contrôle de l’efficacité d'une stérilisation à l'autoclave est surtout réalisé à
l'aide de témoins de stérilisation tels que des rubans indicateurs de stérilisation
vapeur de différents types suivant les fabricants (c/. annexe générale 8
« Quelques adresses utiles de sociétés commercialisant du matériel de
microbiologie ») :
- les « rubans indicateurs vapeur » (CML) sont des rubans présentés en rouleaux (comme des rouleaux de rubans adhésifs). Ils sont conçus selon trois paramètres (temps, température et vapeur saturée) ; les stries blanches du ruban virent
au noir lorsque la stérilisation est satisfaisante ;
- les « rubans témoin » de stérilisation à l'autoclave (Grosseron) sont semblables aux précédents et sont approuvés pour le contrôle de qualité en agroalimentaire (HACCP) ;
- les « adhésifs indicateur d'autoclavage » (Bioblock) qui laissent apparaître
les mots « autoclaved » ou « sterilized » après une stérilisation à l'autoclave à
121 °C pendant 15 minutes ;
- des « rubans indicateurs et de contrôle de stérilisation » à 121 °C et à 134 °C
changeant de couleur après exposition (marron clair ou marron foncé suivant la
durée d'exposition) [VWR™ International].
Il existe d’autres systèmes de contrôle de la stérilisation : pastilles indicatrices
de stérilisation à l'autoclave virant du bleu au rose après exposition à 121 °C penS dant 10 minutes (VWR™ International)...
- La
photocopie non
autonsée
est un
délit