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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
3.1.
L’autoclavage
3.1.1. Principe
Dans une atmosphère de vapeur d’eau exempte d’air, produite sous pression,
toutes les bactéries (y compris les formes sporulées) sont tuées en 20 minutes à
121 °C. C’est la méthode de stérilisation la plus efficace.
3.1.2. Utilisation de l'appareil
L’autoclavage permet :
- de préparer du matériel (milieux de culture, verrerie diverse...) en vue de
son utilisation au laboratoire. Les bactéries se trouvant dans tout ce matériel sont
détruites, y compris les formes sporulées ;
- de décontaminer du matériel après son emploi au laboratoire ( 18 minutes à
134 °C). Les microbes des produits pathologiques, des échantillons d eaux et
d'aliments analysés, des cultures bactériennes de laboratoire... doivent être
impérativement détruits et ils le seront par ce traitement.
Ces conditions de stérilisation remplacent les conditions conventionnelles
(20 minutes à 121 °C) afin d’assurer la destruction des prions, dans la mesure où
les fabricants de produits de microbiologie ne peuvent pas garantir l’absence
d’agents pathogènes transmissibles dans les produits d’origine animale
(cf. supra, paragraphe 2.1.2.1.).
• La circulaire DGS/SD5C/DHOS/E2/DRT/CT1/CT2 n° 2004-382 du 30 juillet
2004 émanant du ministère du Travail et des Affaires sociales est « relative aux
précautions à observer dans les services d'anatomie et cytologie pathologiques, les
salles d’autopsie, les chambres mortuaires et les laboratoires de biologie
« spécialisés ATNC », vis-à-vis du risque de transmission des agents transmissibles conventionnels (ATC) et non conventionnels (ATNC) » ; elle précise les
méthodes à utiliser en milieu médical face aux risques de transmission de la
maladie de Creutzfeld Jakob et autres encéphalopathies dues à des « agents
transmissibles non conventionnels » ou « prions ».
Voici I extrait du texte relatif à l'inactivation physique : « L’inactivation physique nécessite le recours à la chaleur humide. L’opération sera effectuée dans un
autoclave à une température qui ne doit pas être inférieure à 134 °C et pendant
une durée qui ne doit pas être inférieure à 18 minutes ». En effet, ces ATNC
>• sont particulièrement résistants à de nombreux traitements physiques et chimiques (chaleur jusqu à 130 °C en milieu humide, au-delà en chaleur sèche, ultrasons. radiations ionisantes, éthanol, formaldéhyde...).
• Les deux opérations d utilisation d'un autoclave doivent être effectuées de
préférence dans deux autoclaves différents ou au minimum séparément, selon la
norme NI- ISO 7218 de 1996 déjà citée. Cette exigence est maintenant
obligatoirement satisfaite dans les laboratoires d'hygiène (des eaux, des
aliments...) ou autres, installés suivant le «principe de la marche en avant»
( 7 première partie, chapitre 1. « Conception du laboratoire, fonctionnement et
securité ». paragraphe 1.4.).
*
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
3.1.
L’autoclavage
3.1.1. Principe
Dans une atmosphère de vapeur d’eau exempte d’air, produite sous pression,
toutes les bactéries (y compris les formes sporulées) sont tuées en 20 minutes à
121 °C. C’est la méthode de stérilisation la plus efficace.
3.1.2. Utilisation de l'appareil
L’autoclavage permet :
- de préparer du matériel (milieux de culture, verrerie diverse...) en vue de
son utilisation au laboratoire. Les bactéries se trouvant dans tout ce matériel sont
détruites, y compris les formes sporulées ;
- de décontaminer du matériel après son emploi au laboratoire ( 18 minutes à
134 °C). Les microbes des produits pathologiques, des échantillons d eaux et
d'aliments analysés, des cultures bactériennes de laboratoire... doivent être
impérativement détruits et ils le seront par ce traitement.
Ces conditions de stérilisation remplacent les conditions conventionnelles
(20 minutes à 121 °C) afin d’assurer la destruction des prions, dans la mesure où
les fabricants de produits de microbiologie ne peuvent pas garantir l’absence
d’agents pathogènes transmissibles dans les produits d’origine animale
(cf. supra, paragraphe 2.1.2.1.).
• La circulaire DGS/SD5C/DHOS/E2/DRT/CT1/CT2 n° 2004-382 du 30 juillet
2004 émanant du ministère du Travail et des Affaires sociales est « relative aux
précautions à observer dans les services d'anatomie et cytologie pathologiques, les
salles d’autopsie, les chambres mortuaires et les laboratoires de biologie
« spécialisés ATNC », vis-à-vis du risque de transmission des agents transmissibles conventionnels (ATC) et non conventionnels (ATNC) » ; elle précise les
méthodes à utiliser en milieu médical face aux risques de transmission de la
maladie de Creutzfeld Jakob et autres encéphalopathies dues à des « agents
transmissibles non conventionnels » ou « prions ».
Voici I extrait du texte relatif à l'inactivation physique : « L’inactivation physique nécessite le recours à la chaleur humide. L’opération sera effectuée dans un
autoclave à une température qui ne doit pas être inférieure à 134 °C et pendant
une durée qui ne doit pas être inférieure à 18 minutes ». En effet, ces ATNC
>• sont particulièrement résistants à de nombreux traitements physiques et chimiques (chaleur jusqu à 130 °C en milieu humide, au-delà en chaleur sèche, ultrasons. radiations ionisantes, éthanol, formaldéhyde...).
• Les deux opérations d utilisation d'un autoclave doivent être effectuées de
préférence dans deux autoclaves différents ou au minimum séparément, selon la
norme NI- ISO 7218 de 1996 déjà citée. Cette exigence est maintenant
obligatoirement satisfaite dans les laboratoires d'hygiène (des eaux, des
aliments...) ou autres, installés suivant le «principe de la marche en avant»
( 7 première partie, chapitre 1. « Conception du laboratoire, fonctionnement et
securité ». paragraphe 1.4.).
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