Contrôle microbiologique des produits cosmétiques
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4.2.1.3 . Autre milieu de dénombrement
Cf. gélose Sabouraud, deuxième partie, chapitre 7 « Levures et moisissures »,
paragraphe 3.2.
4.2.2. Dénombrement de bactéries aérobies mésophiles par « présence
ou absence »
Étaler 0,1 mL (par exemple) de l’échantillon préparé en bouillon Eugon LT
100 sur un milieu de culture non sélectif coulé en boîte de Pétri tel que :
- la gélose trypcase soja ;
- la gélose LT 100...
Incuber les boîtes de Pétri à 32,5 ± 2,5 °C pendant 48 à 72 heures.
Observer et conclure sur la présence ou l’absence de bactéries aérobies mésophiles dans l’échantillon du produit.
4.2.3. Dénombrement de micro-organismes par mL ou par g de produit
4.2.3.1. Technique d’ensemencement et de dénombrement sur boîtes de Pétri
Laisser en contact à la température du laboratoire le tube de l'échantillon préparé en bouillon Eugon LT 100 le temps nécessaire à la neutralisation des
conservateurs.
► Première technique
Étaler 0,1 mL (représentant 0,01 g de produit) de l’échantillon préparé sur un
milieu de culture non sélectif coulé en boîte de Pétri telle la gélose LT ICM) ou
équivalent ;
Pour la recherche des bactéries, incuber les boîtes de Pétri à 32,5 ± 2.5 °C pendant 72 ± 6 h ; pour les levures et moisissures, incuber de 20 à 25 °C pendant
5 jours.
► Seconde technique
Déposer dans des boîtes de Pétri vides stériles I mL de I échantillon préparé
(représentant 0,1 g de produit) et environ 15 mL d un milieu de culture gélosé en
surfusion à une température inférieure ou égale à 45 °C.
Homogénéiser et maintenir sur une surface plane et froide jusqu a solidification.
Utiliser les mêmes milieux de culture que dans la première technique et incuber aux conditions indiquées.
Compter le nombre de colonies qui se développent, en utilisant la boîte présentant le plus grand nombre de colonies dans la limite de 300 pour les bactéries
et de 100 pour les moisissures. Calculer le nombre moyen d’UFC et multiplier ce
nombre par le taux de dilution de manière à obtenir un résultat en l 1 par g ou
mL de produit.
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4.2.1.3 . Autre milieu de dénombrement
Cf. gélose Sabouraud, deuxième partie, chapitre 7 « Levures et moisissures »,
paragraphe 3.2.
4.2.2. Dénombrement de bactéries aérobies mésophiles par « présence
ou absence »
Étaler 0,1 mL (par exemple) de l’échantillon préparé en bouillon Eugon LT
100 sur un milieu de culture non sélectif coulé en boîte de Pétri tel que :
- la gélose trypcase soja ;
- la gélose LT 100...
Incuber les boîtes de Pétri à 32,5 ± 2,5 °C pendant 48 à 72 heures.
Observer et conclure sur la présence ou l’absence de bactéries aérobies mésophiles dans l’échantillon du produit.
4.2.3. Dénombrement de micro-organismes par mL ou par g de produit
4.2.3.1. Technique d’ensemencement et de dénombrement sur boîtes de Pétri
Laisser en contact à la température du laboratoire le tube de l'échantillon préparé en bouillon Eugon LT 100 le temps nécessaire à la neutralisation des
conservateurs.
► Première technique
Étaler 0,1 mL (représentant 0,01 g de produit) de l’échantillon préparé sur un
milieu de culture non sélectif coulé en boîte de Pétri telle la gélose LT ICM) ou
équivalent ;
Pour la recherche des bactéries, incuber les boîtes de Pétri à 32,5 ± 2.5 °C pendant 72 ± 6 h ; pour les levures et moisissures, incuber de 20 à 25 °C pendant
5 jours.
► Seconde technique
Déposer dans des boîtes de Pétri vides stériles I mL de I échantillon préparé
(représentant 0,1 g de produit) et environ 15 mL d un milieu de culture gélosé en
surfusion à une température inférieure ou égale à 45 °C.
Homogénéiser et maintenir sur une surface plane et froide jusqu a solidification.
Utiliser les mêmes milieux de culture que dans la première technique et incuber aux conditions indiquées.
Compter le nombre de colonies qui se développent, en utilisant la boîte présentant le plus grand nombre de colonies dans la limite de 300 pour les bactéries
et de 100 pour les moisissures. Calculer le nombre moyen d’UFC et multiplier ce
nombre par le taux de dilution de manière à obtenir un résultat en l 1 par g ou
mL de produit.