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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Le milieu complet est disponible en milieu déshydraté et en boîtes de Pétri de
55 mm de diamètre prêtes à l’emploi.
► Mode d’action
La bile de bœuf est inhibitrice de bactéries Gram+ (y compris des streptocoques d’autres groupes) et de certaines bactéries Gram-. L’azoture de sodium est
inhibiteur de bactéries Gram-.
Test esculine : cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne », paragraphe 2.3.2.
52.2.2. Ensemencement et incubation du milieu
► A partir des bouillons de Rothe présomptifs positifs (cf. supra, paragraphe
5.2. LL).
Prélever, à l’aide d’une anse bouclée ou d’une pipette Pasteur préalablement
passée à la flamme, un inoculum dans chaque tube de bouillon et à chaque fois
ensemencer en stries une boîte de gélose BEA.
Incuber les boîtes de Pétri à 37 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures.
► À partir de la gélose de Slanetz et Bartley (Bio-Rad)
Les colonies convexes, sous un aspect rouge, rose ou marron, soit au centre
soit sur l'ensemble de la colonie sont considérées comme typiques de streptocoques du groupe D. et plus précisément d'entérocoques intestinaux.
1 ransférer la membrane (sans la retourner) en l'appliquant à la surface d'une
gélose BEA en boîte de Pétri de 55 mm de diamètre préalablement chauffée à
44 °C.
Incuber la boîte à 44 ± 0.5 °C pendant 2 heures.
5.22.3. Observations, interprétation et dénombrement
Les petites colonies transparentes à halo brun à noir, esculine+ correspondent
à des streptocoques du groupe D.
► Commentaire
Dans les fiches techniques antérieures de ce milieu de culture, il était encore
précisé que :
- des colonies volumineuses opaques, sans halo noir sont en général des
staphylocoques ;
des colonies avec léger brunissement ne pouvant être confondues avec le |
halo noir des colonies de streptocoques du groupe D s’observent avec de rares |
entérobactéries et des levures ;
- des Listeria donnent des colonies semblables à celles des streptocoques du °
Groupe D.
non
autorisée
est un délit
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