Streptococcus et Enterococcus
399
Dans la méthode du NPP, calculer, à l’aide de la table NPP à 3 tubes par dilution, le nombre de streptocoques du groupe D par 100 mL d’eau, en se référant à
la norme NF T 90-411.
Dans la méthode par filtration sur membrane : cf. infra, paragraphe 5.2.2.3.
► Contrôle de qualité du milieu
Les souches Enterococcus faecalis ATCC 33186 et ATCC 19433, Enterococcus faecalis var zymogenes ATCC 29212, Enterococcus faecalis var liquefaciens
CIP 5430, Enterococcus durons ATCC 19432 et Enterococcus faecium CIP
54.32 présentent une bonne croissance sur ce milieu après 24 à 48 heures d'incubation à 37 °C et produisent un anneau violet.
Dans les mêmes conditions, la souche Streptococcus bovis CIP 5623 se développe avec un anneau violet faible. Les souches Streptococcus pyogenes ATCC
19615, Staphylococcus aureus ATCC 25923 et Escherichia coli ATCC 25922
sont inhibées.
5.2.2. Gélose BEA ou gélose bile-esculine-azide
La gélose BEA Bio-Rad est un milieu sélectif utilisé comme test confirmatif
au cours de la recherche et du dénombrement :
- des entérocoques intestinaux du groupe D de Lancefield dans les eaux, par
la technique des membranes filtrantes, conformément à la norme NF EN ISO
7899-2 (août 2000) ;
- des streptocoques dans les eaux par la technique du NPP en tubes.
Plus précisément, sur ce milieu, peuvent être détectés et dénombrés :
— Enterococcus faecalis, Ec. faecium, Ec. dut ans et Ec.hitae, ainsi que
d’autres espèces d’Enterococcus ;
- certaines espèces du genre Streptococcus dont S(. box is et .$<. equinus.
5 .2.2.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule type de ce milieu de culture en g/L d eau distillée est
.. ............................................................................................................
Peptone ..............................................................................................
Extrait de levure...............................................................................
Bile de bœuf déshydratée................................................................
Chlorure de sodium................................................................
Esculine...............................................................................
Citrate d'ammonium ferrique...........................................
Azoture de sodium ........................................................
AgaF.................................pHfinal7.ï±0.là25»C
Stérilisation à l'autoclave : 15 minutes à l-l - -
17
3
5
10
5
I
500 mg
150 mg
15
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Dans la méthode du NPP, calculer, à l’aide de la table NPP à 3 tubes par dilution, le nombre de streptocoques du groupe D par 100 mL d’eau, en se référant à
la norme NF T 90-411.
Dans la méthode par filtration sur membrane : cf. infra, paragraphe 5.2.2.3.
► Contrôle de qualité du milieu
Les souches Enterococcus faecalis ATCC 33186 et ATCC 19433, Enterococcus faecalis var zymogenes ATCC 29212, Enterococcus faecalis var liquefaciens
CIP 5430, Enterococcus durons ATCC 19432 et Enterococcus faecium CIP
54.32 présentent une bonne croissance sur ce milieu après 24 à 48 heures d'incubation à 37 °C et produisent un anneau violet.
Dans les mêmes conditions, la souche Streptococcus bovis CIP 5623 se développe avec un anneau violet faible. Les souches Streptococcus pyogenes ATCC
19615, Staphylococcus aureus ATCC 25923 et Escherichia coli ATCC 25922
sont inhibées.
5.2.2. Gélose BEA ou gélose bile-esculine-azide
La gélose BEA Bio-Rad est un milieu sélectif utilisé comme test confirmatif
au cours de la recherche et du dénombrement :
- des entérocoques intestinaux du groupe D de Lancefield dans les eaux, par
la technique des membranes filtrantes, conformément à la norme NF EN ISO
7899-2 (août 2000) ;
- des streptocoques dans les eaux par la technique du NPP en tubes.
Plus précisément, sur ce milieu, peuvent être détectés et dénombrés :
— Enterococcus faecalis, Ec. faecium, Ec. dut ans et Ec.hitae, ainsi que
d’autres espèces d’Enterococcus ;
- certaines espèces du genre Streptococcus dont S(. box is et .$<. equinus.
5 .2.2.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule type de ce milieu de culture en g/L d eau distillée est
.. ............................................................................................................
Peptone ..............................................................................................
Extrait de levure...............................................................................
Bile de bœuf déshydratée................................................................
Chlorure de sodium................................................................
Esculine...............................................................................
Citrate d'ammonium ferrique...........................................
Azoture de sodium ........................................................
AgaF.................................pHfinal7.ï±0.là25»C
Stérilisation à l'autoclave : 15 minutes à l-l - -
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