Streptococcus et Enterococcus
397
► Composition chimique du milieu de culture
La formule type du bouillon de Rothe Bio-Rad à simple concentration en g/L
d’eau distillée est :
Extrait de viande de bœuf.......................................................................
4,5
Tryptone................................................................................................. 15
Glucose......................................................................................................
7,5
Chlorure de sodium (NaCl).....................................................................
7,5
Azoture de sodium (NaN3)*................................................................... 0,2
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C
* Produit toxique et irritant pour l’homme.
Stérilisation à l’autoclave : 121 ± 1 °C pendant 15 minutes
Ce milieu, disponible en milieu déshydraté peut être préparé, à simple concentration (34,7 g/L de poudre) ou à double concentration (69,4 g/L), en se protégeant lors de sa manipulation (gants, masque, lunettes). Il est aussi disponible en
tubes de 10 mL, à simple ou à double concentration, prêts à 1 emploi.
► Mode d’action du milieu
L’azoture de sodium (ou azide de sodium) est un inhibiteur de bactéries
Gram-.
Le glucose (ose) est la source de carbone.
► Ensemencement et incubation du milieu
En bactériologie des eaux, la technique du NPP à 3 tubes par série est appliquée (c/. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie ».
paragraphe 3.2.2.1.) :
- ensemencer 3 tubes de bouillon de Rothe à double concentration avec cha
cun 10 mL de l’eau à analyser ;
- ensemencer 3 tubes de bouillon de Rothe à simple concentration avec cha
cun 1 mL de l’eau à analyser, puis suivant le même protocole ensemencer. lui e
avec 1 mL de chacune des dilutions décimales.
Incuber les tubes à 37 ± 1 °C pendant 24 et/ou 48 heures.
► Observations et interprétation
Les tubes présentant un trouble bactérien sont positifs Ils ‘
tifs de streptocoques du groupe D. Ils doivent êtreo ^ig
BEA
le milieu de Litsky (cf. infra, paragraphe 5.—
paragraphe 5.2.2.) selon la nonne appliquée.
► Contrôle de qualité du milieu
Les souches d'Enterococcus faecalis CCM12541. E"u , <^^sSQ}p 56.23 pré19432, Enterococcus faecium CIP 54.3- et. tiep oc
heures d’incubation à
sentent une bonne croissance sur ce milieu apres -
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► Composition chimique du milieu de culture
La formule type du bouillon de Rothe Bio-Rad à simple concentration en g/L
d’eau distillée est :
Extrait de viande de bœuf.......................................................................
4,5
Tryptone................................................................................................. 15
Glucose......................................................................................................
7,5
Chlorure de sodium (NaCl).....................................................................
7,5
Azoture de sodium (NaN3)*................................................................... 0,2
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C
* Produit toxique et irritant pour l’homme.
Stérilisation à l’autoclave : 121 ± 1 °C pendant 15 minutes
Ce milieu, disponible en milieu déshydraté peut être préparé, à simple concentration (34,7 g/L de poudre) ou à double concentration (69,4 g/L), en se protégeant lors de sa manipulation (gants, masque, lunettes). Il est aussi disponible en
tubes de 10 mL, à simple ou à double concentration, prêts à 1 emploi.
► Mode d’action du milieu
L’azoture de sodium (ou azide de sodium) est un inhibiteur de bactéries
Gram-.
Le glucose (ose) est la source de carbone.
► Ensemencement et incubation du milieu
En bactériologie des eaux, la technique du NPP à 3 tubes par série est appliquée (c/. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie ».
paragraphe 3.2.2.1.) :
- ensemencer 3 tubes de bouillon de Rothe à double concentration avec cha
cun 10 mL de l’eau à analyser ;
- ensemencer 3 tubes de bouillon de Rothe à simple concentration avec cha
cun 1 mL de l’eau à analyser, puis suivant le même protocole ensemencer. lui e
avec 1 mL de chacune des dilutions décimales.
Incuber les tubes à 37 ± 1 °C pendant 24 et/ou 48 heures.
► Observations et interprétation
Les tubes présentant un trouble bactérien sont positifs Ils ‘
tifs de streptocoques du groupe D. Ils doivent êtreo ^ig
BEA
le milieu de Litsky (cf. infra, paragraphe 5.—
paragraphe 5.2.2.) selon la nonne appliquée.
► Contrôle de qualité du milieu
Les souches d'Enterococcus faecalis CCM12541. E"u , <^^sSQ}p 56.23 pré19432, Enterococcus faecium CIP 54.3- et. tiep oc
heures d’incubation à
sentent une bonne croissance sur ce milieu apres -