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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
5.2.1.4. Confirmation et/ôu dénombrement
Dans le cas des denrées alimentaires, confirmer par le test de la coagulase libre
ou éventuellement d'autres tests (cf. infra, paragraphe 6.1.) sur au moins cinq
colonies typiques de S. aureus et cinq colonies non caractéristiques.
Pour l'expression des résultats et le calcul du nombre de staphylocoques à coagulase positive par g ou par mL d’aliment, consulter la norme NF EN ISO 6888'Î/Al.
5.2.2. Gélose de Baird-Parker RPF
La gélose Baird-Parker avec RPF (Rabbit Plasma Fibrinogen)
bioMérieux “ SA est fondée sur la formule de HJ Beckers (1984). Elle est utilisée
pour la recherche et le dénombrement sans confirmation des staphylocoques à
coagulase positive dans les denrées alimentaires. Ce milieu est conforme à la
norme NF EN ISO 6888-2/A1 (2003) et NF V 08-057-2 (2004).
5.2.2.1. Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
RI (milieu de base)
Peptone de viande (bovin/porcin) ....................................................... 15
Extrait de levure....................................................................................
1
Chlorure de lithium ..............................................................................
5
Pyruvate de sodium................................................................................ 10
Glycine................................................................................................... 12
Agar.......................................................................................... ............... 12,5
R2 (milieu complet)
Fibrinogène bovin ................................................................................
3,75
Plasma de lapin .................................................................................... 25 mL
Inhibiteur de trypsine............................................................................ 25 mg
Fellurite de potassium............................................................................ 25 mg
pH 7,6
( e milieu de base et son supplément RPF sont disponibles en flacons pour =
préparer des boîtes de Pétri suivant les instructions données.
► MtKie d'action
I
Cf. supra, paragraphe 5.1.1.
|
Le plasma de lapin contenu dans le supplément RPF permet d'effectuer le test I
coagulase libre (cf. infra, paragraphe 6.LL). Le Fibrinogène bovin (protéine du «
plasma) intensifie la réaction de la coagulase. L’inhibition de la trypsine empê- ।
ehe la fibrinolyse totale ou partielle des halos formés autour des colonies à coa- ?
gulase positive.
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