Pseudomonas et ex-Pseudomonas
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- test PNPG : test de décomposition du substrat 4-nitrophényl-pD-galactopyranoside par la P-galactosidase (Para-NitroPhényl-PD-Galactopyranosidase ou
PNPG).
Lire toutes ces réactions spontanées.
Tous ces tests sont présentés en bactériologie conventionnelle dans la première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification bactérienne», paragraphes 2.2.1., 3.2.2., 3.4., 2.3.2., 3.1.1. et 2.2.3.2.
Mais, des différences de principe des réactions utilisées en technique API existent parfois par rapport à la méthode conventionnelle.
5.24.2. Tests NO3 et TRP
Révéler les résultats de ces deux tests en mettant les tests d’assimilation (GLU
àPAC) à l’abri d’une contamination de l’air ; pour cela, placer le couvercle de la
boîte d’incubation au-dessus de ces tests pendant la période de révélation des
tests NO3 et TRP.
Pour le test NO3, ajouter une goutte de réactifs NIT 1 et NIT 2 dans la cupule
N03. Les résultats sont les suivants :
- après 5 minutes, une couleur rouge indique une réaction positive (production
de nitrites) : test réduction des nitrates positif ;
- en cas de réaction négative, ajouter 2 à 3 mg de réactif Zn dans la cupule NO3.
• une cupule devenant rose-rouge indique que les nitrates encore présents dans
le microtube ont été réduits en nitrites par le Zn (test réduction des nitrates
négatif).
• une cupule restée incolore après 5 minutes, avec parfois la présence de
microbulles) indique que les nitrates ont été transformés au-delà des nitrites en
diazote N9 : test réduction des nitrates positil.
L’interprétation du test NO, est semblable au test conventionnel nitrateréductases (cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimtques pour l’identification bactérienne », paragraphe 1.4.1).
5-2.4.3. Tests TRP
Ajouter une goutte de réactif de James. Une couleur rose diffusant dans toute
la cupule indique une réaction positive.
5-2.4.4. Tests GLU à PAC
■ 1 s’agit de tests d’assimilation de sucres, d’acides ou autre substrat. Inoculés
avec un milieu minimum, les bactéries se développent seulement si elles sont
capables d’utiliser le substrat correspondant.
Observer la pousse bactérienne. Une cupule trouble indique une réaction positive.
Des pousses d’intensité intermédiaire peuvent être observées et notées +/- ou -/+.
Procéder à l’identification de la souche bactérienne. Cependant dans deux cas.
une nouvelle incubation est nécessaire :
- si le profil n’est pas trouvé dans le catalogue analytique API 20 NE ;
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- test PNPG : test de décomposition du substrat 4-nitrophényl-pD-galactopyranoside par la P-galactosidase (Para-NitroPhényl-PD-Galactopyranosidase ou
PNPG).
Lire toutes ces réactions spontanées.
Tous ces tests sont présentés en bactériologie conventionnelle dans la première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification bactérienne», paragraphes 2.2.1., 3.2.2., 3.4., 2.3.2., 3.1.1. et 2.2.3.2.
Mais, des différences de principe des réactions utilisées en technique API existent parfois par rapport à la méthode conventionnelle.
5.24.2. Tests NO3 et TRP
Révéler les résultats de ces deux tests en mettant les tests d’assimilation (GLU
àPAC) à l’abri d’une contamination de l’air ; pour cela, placer le couvercle de la
boîte d’incubation au-dessus de ces tests pendant la période de révélation des
tests NO3 et TRP.
Pour le test NO3, ajouter une goutte de réactifs NIT 1 et NIT 2 dans la cupule
N03. Les résultats sont les suivants :
- après 5 minutes, une couleur rouge indique une réaction positive (production
de nitrites) : test réduction des nitrates positif ;
- en cas de réaction négative, ajouter 2 à 3 mg de réactif Zn dans la cupule NO3.
• une cupule devenant rose-rouge indique que les nitrates encore présents dans
le microtube ont été réduits en nitrites par le Zn (test réduction des nitrates
négatif).
• une cupule restée incolore après 5 minutes, avec parfois la présence de
microbulles) indique que les nitrates ont été transformés au-delà des nitrites en
diazote N9 : test réduction des nitrates positil.
L’interprétation du test NO, est semblable au test conventionnel nitrateréductases (cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimtques pour l’identification bactérienne », paragraphe 1.4.1).
5-2.4.3. Tests TRP
Ajouter une goutte de réactif de James. Une couleur rose diffusant dans toute
la cupule indique une réaction positive.
5-2.4.4. Tests GLU à PAC
■ 1 s’agit de tests d’assimilation de sucres, d’acides ou autre substrat. Inoculés
avec un milieu minimum, les bactéries se développent seulement si elles sont
capables d’utiliser le substrat correspondant.
Observer la pousse bactérienne. Une cupule trouble indique une réaction positive.
Des pousses d’intensité intermédiaire peuvent être observées et notées +/- ou -/+.
Procéder à l’identification de la souche bactérienne. Cependant dans deux cas.
une nouvelle incubation est nécessaire :
- si le profil n’est pas trouvé dans le catalogue analytique API 20 NE ;