Pseudomonas et ex-Pseudomonas
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5. Identification de Pseudomonas et ex-Pseudomonas
5.1. Milieux de confirmation
Les géloses King A et King B Bio-Rad sont deux milieux favorisant la pigmentation des cultures de Pseudomonas, en particulier de Pseudomonas aeruginosa.
Ces deux milieux sont utilisés comme test de confirmation, suite à la recherche
de Ps. aeruginosa :
-dans les eaux de piscines pour le premier, conformément à la norme NF T
90-421 (1989) pour les examens bactériologiques des eaux de piscines ;
-dans les eaux destinées à la consommation humaine, les eaux embouteillées
et les eaux de piscines pour le second, conformément à la norme NF EN 12780
(2002) déjà citée.
5.1.7. Composition chimique et mode d'action des deux milieux de culture
• La formule type de la gélose King A en g/L d eau distillée est.
Peptone bactériologique « A »...........................................................
Glycérol.................................................................................................. . 0
K2SO4 (anhydre)..................................................................................
14
MgCl2 (anhydre)..................................................................................
Agar purifié...........................................................................................
pH 7,2 ± 0,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en tubes de 7 mL prêts à I emploi.
• La formule type de la gélose King B en g/L d eau distillée est
Peptone bactériologique « B »..................................................
æ
Glycérol............................................................ '
...................
15
Hydrogénophosphate de potassium anhydre ( 2
4) • • • •
। <_
Sulfate de magnésium hydraté (MgSO47H2O)..............
Agar purifié............................................. •'•••• *
....................
pH 7,2 ± 0,2 à 25 C
Ce milieu est disponible en tubes de 7 mL prêts à
P
► Mode d’action de ces deux milieux
La gelose King A favorise la sy”theæ *Ppig,nents (pyiyanine et pyovermiheu de culture en bleu ou en vert si les
PS
|3) u pyocyanine.
dîne) sont synthétisés en meme temps (cf • />
b|eu
ajoul de 2 mL dc
te soluble dans le chloroforme colore «I
spP jf,quJe de Pseudtmo.
chloroforme dans la culture et agitation. C p g
nas aeruginosa (bacille pyocyanique).
La gélose King B favorise la synthèse du pigment jaune-vert fluorescent (pyoverdinl) qui colore le milieu en jaune-vert avec une fluorescence sous une
lumière ultraviolette. Ce pigment est fabriqué par Ps. aer^nosa e. d autres
espèces de Pseudomonas (cf supra, tableau I - •
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5. Identification de Pseudomonas et ex-Pseudomonas
5.1. Milieux de confirmation
Les géloses King A et King B Bio-Rad sont deux milieux favorisant la pigmentation des cultures de Pseudomonas, en particulier de Pseudomonas aeruginosa.
Ces deux milieux sont utilisés comme test de confirmation, suite à la recherche
de Ps. aeruginosa :
-dans les eaux de piscines pour le premier, conformément à la norme NF T
90-421 (1989) pour les examens bactériologiques des eaux de piscines ;
-dans les eaux destinées à la consommation humaine, les eaux embouteillées
et les eaux de piscines pour le second, conformément à la norme NF EN 12780
(2002) déjà citée.
5.1.7. Composition chimique et mode d'action des deux milieux de culture
• La formule type de la gélose King A en g/L d eau distillée est.
Peptone bactériologique « A »...........................................................
Glycérol.................................................................................................. . 0
K2SO4 (anhydre)..................................................................................
14
MgCl2 (anhydre)..................................................................................
Agar purifié...........................................................................................
pH 7,2 ± 0,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en tubes de 7 mL prêts à I emploi.
• La formule type de la gélose King B en g/L d eau distillée est
Peptone bactériologique « B »..................................................
æ
Glycérol............................................................ '
...................
15
Hydrogénophosphate de potassium anhydre ( 2
4) • • • •
। <_
Sulfate de magnésium hydraté (MgSO47H2O)..............
Agar purifié............................................. •'•••• *
....................
pH 7,2 ± 0,2 à 25 C
Ce milieu est disponible en tubes de 7 mL prêts à
P
► Mode d’action de ces deux milieux
La gelose King A favorise la sy”theæ *Ppig,nents (pyiyanine et pyovermiheu de culture en bleu ou en vert si les
PS
|3) u pyocyanine.
dîne) sont synthétisés en meme temps (cf • />
b|eu
ajoul de 2 mL dc
te soluble dans le chloroforme colore «I
spP jf,quJe de Pseudtmo.
chloroforme dans la culture et agitation. C p g
nas aeruginosa (bacille pyocyanique).
La gélose King B favorise la synthèse du pigment jaune-vert fluorescent (pyoverdinl) qui colore le milieu en jaune-vert avec une fluorescence sous une
lumière ultraviolette. Ce pigment est fabriqué par Ps. aer^nosa e. d autres
espèces de Pseudomonas (cf supra, tableau I - •