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Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
Le phosphate acide de potassium du milieu permet d'inhiber la production de
pyocyanine. Le sulfate de magnésium fournit les cations nécessaires à l’activation de la pyoverdine.
5.1.2. Ensemencement et incubation des deux milieux
Faire fondre des tubes de géloses King A et King B dans un bain-marie
bouillant. Refroidir entre 44 et 49 °C et laisser les tubes en position inclinée
jusqu'à solidification.
► Protocole général
À partir d'une culture en bouillon ou sur gélose de la souche à tester, ensemencer un tube de chaque milieu en faisant une strie médiane à la surface de la gélose
en pente du milieu. Il est impératif de ne pas revisser la capsule des deux tubes.
Incuber à 30 ± 1 °C pendant 1 à 4 jours.
► Applications en microbiologie des eaux
Dans la recherche et le dénombrement des Pseudomonas aeruginosa sur une
gélose au cétrimide et à l'acide nalidixique dans les eaux de piscines, repiquer les
colonies typiques, fluorescentes sous rayonnement ultraviolet, dans des tubes de
gélose de King A. La production de la pyocyanine par ces souches confirme leur
identification à Ps. aeruginosa.
Dans la recherche de Ps. aeruginosa dans les eaux destinées à la consommation humaine..., repiquer des géloses King B suivant le protocole précédemment
décrit (cf. supra, paragraphe 4.2.2.4.).
5.1.3. Lecture et interprétation des deux milieux
Cf. supra, paragraphe 5.1.1. (mode d'action des ces deux milieux).
5.1.4. Contrôle de qualité des deux milieux
Les résultats des performances culturales de ces deux milieux sont rapportés
dans le tableau 115.
Tableau 115 ■ Contrôle de qualité des géloses King A et B.
Souches bactériennes
Couleur des colonies après 24 à 48 heures
d’incubation à 36 °C
Gélose King A
Gélose King B
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Bleu-vert
Jaune vert
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Pseudomonas aeruginosa ATCC 17934
Pseudomonas fluorescens CIP 69.13
Incolore
Jaune vert faible
Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
Le phosphate acide de potassium du milieu permet d'inhiber la production de
pyocyanine. Le sulfate de magnésium fournit les cations nécessaires à l’activation de la pyoverdine.
5.1.2. Ensemencement et incubation des deux milieux
Faire fondre des tubes de géloses King A et King B dans un bain-marie
bouillant. Refroidir entre 44 et 49 °C et laisser les tubes en position inclinée
jusqu'à solidification.
► Protocole général
À partir d'une culture en bouillon ou sur gélose de la souche à tester, ensemencer un tube de chaque milieu en faisant une strie médiane à la surface de la gélose
en pente du milieu. Il est impératif de ne pas revisser la capsule des deux tubes.
Incuber à 30 ± 1 °C pendant 1 à 4 jours.
► Applications en microbiologie des eaux
Dans la recherche et le dénombrement des Pseudomonas aeruginosa sur une
gélose au cétrimide et à l'acide nalidixique dans les eaux de piscines, repiquer les
colonies typiques, fluorescentes sous rayonnement ultraviolet, dans des tubes de
gélose de King A. La production de la pyocyanine par ces souches confirme leur
identification à Ps. aeruginosa.
Dans la recherche de Ps. aeruginosa dans les eaux destinées à la consommation humaine..., repiquer des géloses King B suivant le protocole précédemment
décrit (cf. supra, paragraphe 4.2.2.4.).
5.1.3. Lecture et interprétation des deux milieux
Cf. supra, paragraphe 5.1.1. (mode d'action des ces deux milieux).
5.1.4. Contrôle de qualité des deux milieux
Les résultats des performances culturales de ces deux milieux sont rapportés
dans le tableau 115.
Tableau 115 ■ Contrôle de qualité des géloses King A et B.
Souches bactériennes
Couleur des colonies après 24 à 48 heures
d’incubation à 36 °C
Gélose King A
Gélose King B
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Bleu-vert
Jaune vert
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Pseudomonas aeruginosa ATCC 17934
Pseudomonas fluorescens CIP 69.13
Incolore
Jaune vert faible