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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Composition chimique du milieu
La composition chimique (formule type) de ce milieu en g/L d’eau distillée est :
Extrait de levure..................................................................................... 5
Glucose.................................................................................................... 20
Chloramphénicol ................................................................................... 0,1
Agar...........................................................................
pH final 6,6 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l'autoclave à 121 ± 1 °C pendant 15 minutes
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté et en flacons de 100 mL prêts à
l'emploi.
► Recommandation pratique
La gélose YGC peut être additionnée d'une solution de gentamicine à la concentration finale de lOOmg/L, après refroidissement préalable du milieu entre 44 et
47 °C lorsque qu'on soupçonne la présence de bacilles Gram- en abondance dans
l'aliment (viandes et produits de la pêche crus).
► Mode d'action du milieu
La croissance des levures et moisissures est favorisée par les substances nutritives apportées par l'extrait de levure et le glucose utilisé comme source énergétique.
Le chloramphénicol est un antibiotique antibactérien à large spectre (cf. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux
de culture », tableau 23B).
► Ensemencement et incubation du milieu
L ensemencement des boîtes de gélose YGC peut se faire :
- soit en étalant 0,1 mL de l’échantillon à analyser ou 0,1 mL de la suspension
mère (autres produits) et/ou 0,1 mL de ses dilutions décimales à la surface de la
gélose « séchée ». Laisser sécher ;
- soit en transférant 1 mL de l'échantillon à analyser ou 1 mL de la suspension
mère (autres produits) et/ou 1 mL de ses dilutions décimales dans une boîte de
Petii vide stérile. Couler ensuite 12 à 15 mL de milieu fondu et refroidi entre 44
et 47 °C, homogénéiser et laisser solidifier.
|
Incuber les boîtes préparées à 25 ± 1 °C pendant 3 à 5 jours.
► Lecture et interprétation du milieu
Dénombrer les colonies de levures et de moisissures dans les boîtes contenant
entre 15 et moins de 150 colonies. Cependant, les boîtes contenant moins de 15 ou ।
0 colonies peuvent parfois être retenues pour une estimation des petits nombres, j
l n examen microscopique peut parfois s’avérer utile pour différencier une f
colonie de levure d’une colonie bactérienne.
I
exprimer le résultat, consulter la norme utilisée ainsi que la norme NF >
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Composition chimique du milieu
La composition chimique (formule type) de ce milieu en g/L d’eau distillée est :
Extrait de levure..................................................................................... 5
Glucose.................................................................................................... 20
Chloramphénicol ................................................................................... 0,1
Agar...........................................................................
pH final 6,6 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l'autoclave à 121 ± 1 °C pendant 15 minutes
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté et en flacons de 100 mL prêts à
l'emploi.
► Recommandation pratique
La gélose YGC peut être additionnée d'une solution de gentamicine à la concentration finale de lOOmg/L, après refroidissement préalable du milieu entre 44 et
47 °C lorsque qu'on soupçonne la présence de bacilles Gram- en abondance dans
l'aliment (viandes et produits de la pêche crus).
► Mode d'action du milieu
La croissance des levures et moisissures est favorisée par les substances nutritives apportées par l'extrait de levure et le glucose utilisé comme source énergétique.
Le chloramphénicol est un antibiotique antibactérien à large spectre (cf. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux
de culture », tableau 23B).
► Ensemencement et incubation du milieu
L ensemencement des boîtes de gélose YGC peut se faire :
- soit en étalant 0,1 mL de l’échantillon à analyser ou 0,1 mL de la suspension
mère (autres produits) et/ou 0,1 mL de ses dilutions décimales à la surface de la
gélose « séchée ». Laisser sécher ;
- soit en transférant 1 mL de l'échantillon à analyser ou 1 mL de la suspension
mère (autres produits) et/ou 1 mL de ses dilutions décimales dans une boîte de
Petii vide stérile. Couler ensuite 12 à 15 mL de milieu fondu et refroidi entre 44
et 47 °C, homogénéiser et laisser solidifier.
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Incuber les boîtes préparées à 25 ± 1 °C pendant 3 à 5 jours.
► Lecture et interprétation du milieu
Dénombrer les colonies de levures et de moisissures dans les boîtes contenant
entre 15 et moins de 150 colonies. Cependant, les boîtes contenant moins de 15 ou ।
0 colonies peuvent parfois être retenues pour une estimation des petits nombres, j
l n examen microscopique peut parfois s’avérer utile pour différencier une f
colonie de levure d’une colonie bactérienne.
I
exprimer le résultat, consulter la norme utilisée ainsi que la norme NF >