Listeria
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Incuber à 37 °C pendant 24 ± 3 heures et éventuellement 24 ± 3 heures supplémentaires.
Dénombrer les colonies caractéristiques de Listeria monocytogenes en appliquant la norme NF EN ISO 11290-2/A1. Mais, elles doivent être confirmées et
identifiées.
4.4.
Confirmation des colonies de Listeria
4.4.1. Listeria monocytogenes
En vue de confirmer l’appartenance des colonies caractéristiques observées à
Listeria monocytogenes, on peut associer :
-soit une identification par microméthode (cf infra, paragraphe 5.1.) au test
hémolyse ou au test de Camp ;
-soit le test de Camp et le test d’utilisation des glucides (L-Rhamnose ou Dxylose).
4.4.1.1. Test hémolyse
Rechercher le type d’hémolyse des souches sur des géloses Columbia au sang
de mouton ou sur des géloses trypcase soja au sang de mouton (cf première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de
culture », paragraphes 4.1.2.2. et 4.1.1.2.).
Les résultats du test hémolyse sont donnés pour les Listeria dans le tableau
102 (cf infra, paragraphe 5.1.4.).
4.4.1.2. Test de Camp
Réaliser le test de Camp sur une boîte de gélose au sang (cf. technique dans la
norme XP V 08-62).
4
4.1.3. Test de fermentation de glucides
Inoculer des tubes de « bouillon pour la fermentation des glucides » à partir
des cultures réalisées sur les boîtes de gélose à la tryptone de soja et à 1 extrait
de levure telle la gélose TSYEA (cf norme XP V 08-062 pour les compositions
chimiques de ces deux milieux de culture ; cf infra, informations pratiques).
Incuber à 37 °C jusqu’à 5 jours et observer.
Le pourpre de bromocrésol (indicateur de pH) du bouillon pour la fermentation des glucides vire au jaune en présence des acides provenant de la dégradat'on du sucre par la souche bactérienne testée.
► Informations pratiques
La gélose TSYEA (ou TSYE) peut être préparée à partir d’un bouillon tryptocaséine soja (cf première partie, chapitre 3 « Préparation du matériel et des
milieux de culture », paragraphe 4.1.1.2.), auquel est ajouté de l’extrait de levure
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Incuber à 37 °C pendant 24 ± 3 heures et éventuellement 24 ± 3 heures supplémentaires.
Dénombrer les colonies caractéristiques de Listeria monocytogenes en appliquant la norme NF EN ISO 11290-2/A1. Mais, elles doivent être confirmées et
identifiées.
4.4.
Confirmation des colonies de Listeria
4.4.1. Listeria monocytogenes
En vue de confirmer l’appartenance des colonies caractéristiques observées à
Listeria monocytogenes, on peut associer :
-soit une identification par microméthode (cf infra, paragraphe 5.1.) au test
hémolyse ou au test de Camp ;
-soit le test de Camp et le test d’utilisation des glucides (L-Rhamnose ou Dxylose).
4.4.1.1. Test hémolyse
Rechercher le type d’hémolyse des souches sur des géloses Columbia au sang
de mouton ou sur des géloses trypcase soja au sang de mouton (cf première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de
culture », paragraphes 4.1.2.2. et 4.1.1.2.).
Les résultats du test hémolyse sont donnés pour les Listeria dans le tableau
102 (cf infra, paragraphe 5.1.4.).
4.4.1.2. Test de Camp
Réaliser le test de Camp sur une boîte de gélose au sang (cf. technique dans la
norme XP V 08-62).
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4.1.3. Test de fermentation de glucides
Inoculer des tubes de « bouillon pour la fermentation des glucides » à partir
des cultures réalisées sur les boîtes de gélose à la tryptone de soja et à 1 extrait
de levure telle la gélose TSYEA (cf norme XP V 08-062 pour les compositions
chimiques de ces deux milieux de culture ; cf infra, informations pratiques).
Incuber à 37 °C jusqu’à 5 jours et observer.
Le pourpre de bromocrésol (indicateur de pH) du bouillon pour la fermentation des glucides vire au jaune en présence des acides provenant de la dégradat'on du sucre par la souche bactérienne testée.
► Informations pratiques
La gélose TSYEA (ou TSYE) peut être préparée à partir d’un bouillon tryptocaséine soja (cf première partie, chapitre 3 « Préparation du matériel et des
milieux de culture », paragraphe 4.1.1.2.), auquel est ajouté de l’extrait de levure