Listeria
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4.1.2.2. Ensemencement et incubation du milieu
Cf. infra, paragraphes 4.2. et 4.3.
4.1.23. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation :
- les colonies de Listeria monocytogenes sont bleu turquoise, entourées d’un
halo opaque, mais aussi celles de L. ivanovii ;
-les colonies de Listeria autres que les deux espèces ci-dessus sont de la
même couleur, mais sans le halo opaque.
Les « limites du test » relatives à la lecture de ce milieu sont présentées
d’après la fiche technique du fabricant :
- l’espèce L. ivanovii se développe en donnant des colonies caractéristiques
bleu turquoise entourées d’un halo opaque. Toutefois, certaines souches présentent une croissance faible ou polymorphe ;
- certaines souches, autres que L. monocytogenes, peuvent se développer sur
le milieu en donnant des colonies caractéristiques (certains Bacillus) ;
- dans la plupart des cas, les souches de L. monocytogenes donnent des colonies caractéristiques dès 24 heures d'incubation. Toutefois, il est nécessaire de
prolonger l’incubation jusqu’à 48 heures pour les résultats négatifs ;
- le développement est fonction des exigences propres à chaque micro-organisme. Il est donc possible que certaines souches de Listeria ayant des exigences
spécifiques ne se développent pas (par exemple L. seeligeri).
4.1.3. Gélose Oxford et gélose Palcam bioMérieux SA
La gélose Oxford, fondée sur la formule de Curtis et al. et la gélose Palcam.
fondée sur la formule décrite par Van Netten et al. sont recommandées pour
I isolement sélectif des Listeria à partir des denrées alimentaires.
Elles sont conformes aux normes NF EN ISO 11290-1 et 11290-2 (1998), qui
ont été modifiées par les normes NF EN ISO 11290-1/A1 (2005) et 11290-2/AI
(2005). L'une ou l’autre de ces géloses peut constituer le deuxième milieu sélectif pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes, le premier
milieu imposé étant celui d’Ottaviani Agosti (cf. supra, paragraphe 4.1.2.).
4.13.1. Composition chimique et mode d’action de la gélose Oxford
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d eau purifiée est .
Peptones (bovins ou porcins)..............................................................
Amidon...................................................................................................
'
Chlorure de sodium...............................................................................
$
Agar........................................................................................................ 10
Esculine...................................................................................................
1
Citrate de fer ammoniacal...................................................................... 0,5
Chlorure de lithium............................................................................... 15
................................................................................................................ 0,005
Colistine................................................................................................. 0’02
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4.1.2.2. Ensemencement et incubation du milieu
Cf. infra, paragraphes 4.2. et 4.3.
4.1.23. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation :
- les colonies de Listeria monocytogenes sont bleu turquoise, entourées d’un
halo opaque, mais aussi celles de L. ivanovii ;
-les colonies de Listeria autres que les deux espèces ci-dessus sont de la
même couleur, mais sans le halo opaque.
Les « limites du test » relatives à la lecture de ce milieu sont présentées
d’après la fiche technique du fabricant :
- l’espèce L. ivanovii se développe en donnant des colonies caractéristiques
bleu turquoise entourées d’un halo opaque. Toutefois, certaines souches présentent une croissance faible ou polymorphe ;
- certaines souches, autres que L. monocytogenes, peuvent se développer sur
le milieu en donnant des colonies caractéristiques (certains Bacillus) ;
- dans la plupart des cas, les souches de L. monocytogenes donnent des colonies caractéristiques dès 24 heures d'incubation. Toutefois, il est nécessaire de
prolonger l’incubation jusqu’à 48 heures pour les résultats négatifs ;
- le développement est fonction des exigences propres à chaque micro-organisme. Il est donc possible que certaines souches de Listeria ayant des exigences
spécifiques ne se développent pas (par exemple L. seeligeri).
4.1.3. Gélose Oxford et gélose Palcam bioMérieux SA
La gélose Oxford, fondée sur la formule de Curtis et al. et la gélose Palcam.
fondée sur la formule décrite par Van Netten et al. sont recommandées pour
I isolement sélectif des Listeria à partir des denrées alimentaires.
Elles sont conformes aux normes NF EN ISO 11290-1 et 11290-2 (1998), qui
ont été modifiées par les normes NF EN ISO 11290-1/A1 (2005) et 11290-2/AI
(2005). L'une ou l’autre de ces géloses peut constituer le deuxième milieu sélectif pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes, le premier
milieu imposé étant celui d’Ottaviani Agosti (cf. supra, paragraphe 4.1.2.).
4.13.1. Composition chimique et mode d’action de la gélose Oxford
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d eau purifiée est .
Peptones (bovins ou porcins)..............................................................
Amidon...................................................................................................
'
Chlorure de sodium...............................................................................
$
Agar........................................................................................................ 10
Esculine...................................................................................................
1
Citrate de fer ammoniacal...................................................................... 0,5
Chlorure de lithium............................................................................... 15
................................................................................................................ 0,005
Colistine................................................................................................. 0’02