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Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
monocytogenes. Elle est également utilisable selon une méthode alternative, qui
a fait l'objet d'une validation Afnor.
4.1.2.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de caséine et de viande (bovin et porcin)......................
24
Extrait de levure...............................................................................
10
Pyruvate de sodium..........................................................................
2
Glucose.............................................................................................
2
Glycérophosphate de magnésium...................................................
1
Sulfate de magnésium......................................................................
0,5
Chlorure de sodium..........................................................................
5
Chlorure de lithium..........................................................................
10
Hydrogénophosphate disodique.....................................................
2,5
5-bromo 4-chloro 3-indolyl-P-D-glucopyranoside......................
0,05
L-a-phosphatidyl-inositol...............................................................
2
Acide nalidixique............................................................................
0,02
Ceftazidime......................................................................................
0,02
Sulfate de polymyxine B................................................................. 76700 U
Cycloheximide................................................................................
0,05
Agar...................................................................................................
13
pH 7,2
Ce milieu de culture est disponible en boîtes de Pétri prêtes à l’emploi. Laisser
revenir les boîtes à température ambiante avant usage.
► Mode d'action
Les agents sélectifs de ce milieu sont le chlorure de lithium et des antibiotiques
qui inhibent la flore interférente des Listeria contenue dans les aliments.
Ces antibiotiques antibactériens et antifongiques sont :
- l'acide nalidixique (cf. supra, paragraphe 4.1.1.1.) ;
la ceftazidime, antibiotique de la famille des bêta-lactamines, céphalosporine de troisième génération, active sur les entérobactéries, parfois sur Pseudomonas aeruginosa... ;
le sulfate de polymyxine B, antibiotique de la famille des polypeptides, à
spectre étroit, agissant sur certaines entérobactéries et sur Ps. aeruginosa.
la cycloheximide, antibiotique antifongique (champignons, levures).
€ cite gélose est composée de deux substrats chromogènes :
la L-a-phosphatidyl-inositol, substrat chromogène assurant la détection de
la phospholipase C des Listeria, dont l'action se traduit par l’apparition d'un halo
opaque autour des colonies ;
le 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-P-D-glucopyranoside, substrat chromogène
permettant la détection de la {3-glucosidase des Listeria, par libération d’un produit chromogène bleu turquoise.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
monocytogenes. Elle est également utilisable selon une méthode alternative, qui
a fait l'objet d'une validation Afnor.
4.1.2.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de caséine et de viande (bovin et porcin)......................
24
Extrait de levure...............................................................................
10
Pyruvate de sodium..........................................................................
2
Glucose.............................................................................................
2
Glycérophosphate de magnésium...................................................
1
Sulfate de magnésium......................................................................
0,5
Chlorure de sodium..........................................................................
5
Chlorure de lithium..........................................................................
10
Hydrogénophosphate disodique.....................................................
2,5
5-bromo 4-chloro 3-indolyl-P-D-glucopyranoside......................
0,05
L-a-phosphatidyl-inositol...............................................................
2
Acide nalidixique............................................................................
0,02
Ceftazidime......................................................................................
0,02
Sulfate de polymyxine B................................................................. 76700 U
Cycloheximide................................................................................
0,05
Agar...................................................................................................
13
pH 7,2
Ce milieu de culture est disponible en boîtes de Pétri prêtes à l’emploi. Laisser
revenir les boîtes à température ambiante avant usage.
► Mode d'action
Les agents sélectifs de ce milieu sont le chlorure de lithium et des antibiotiques
qui inhibent la flore interférente des Listeria contenue dans les aliments.
Ces antibiotiques antibactériens et antifongiques sont :
- l'acide nalidixique (cf. supra, paragraphe 4.1.1.1.) ;
la ceftazidime, antibiotique de la famille des bêta-lactamines, céphalosporine de troisième génération, active sur les entérobactéries, parfois sur Pseudomonas aeruginosa... ;
le sulfate de polymyxine B, antibiotique de la famille des polypeptides, à
spectre étroit, agissant sur certaines entérobactéries et sur Ps. aeruginosa.
la cycloheximide, antibiotique antifongique (champignons, levures).
€ cite gélose est composée de deux substrats chromogènes :
la L-a-phosphatidyl-inositol, substrat chromogène assurant la détection de
la phospholipase C des Listeria, dont l'action se traduit par l’apparition d'un halo
opaque autour des colonies ;
le 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-P-D-glucopyranoside, substrat chromogène
permettant la détection de la {3-glucosidase des Listeria, par libération d’un produit chromogène bleu turquoise.