3(X)
Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
4.
Recherche et dénombrement
La détection et le dénombrement de Listeria monocytogenes en microbiologie
des aliments peut être réalisée suivant :
— les deux normes NF EN ISO 11290-1/Al et NF EN ISO 11290-2/A1 (2005)
qui utilisent les milieux Fraser et Fraser-Demi comme milieux d’enrichissement
et l'agar Listeria selon Ottaviani et Agosti comme milieu sélectif d’isolement;
- des méthodes alternatives validées par Afnor, en particulier la « méthode
alternative Bio-Rad » utilisant le milieu Rapid’L Mono ou la « méthode alternative ALOA One Day AES Laboratoire » utilisant le milieu ALOA®(Agar Listeria selon Ottaviani et Agosti) (Delarras et Trébaol, 2003) ;
- la méthode présentée dans le document « Food safety » Bio-Rad (2003) qui
se fonde sur les ISO standards 11290-1 et 11290-2 en correspondance avec les
normes ci-dessus.
La norme XP V 08-62 (2000) en microbiologie des aliments présente une
méthode de routine pour le dénombrement de Listeria monocytogenes.
Une détection rapide des Listeria et des L. monocytogenes dans les produits
alimentaires peut aussi être réalisée en utilisant le système VIDAS
bioMérieux® SA. Il utilise les milieux de culture bouillon Fraser et Fraser-Demi.
géloses Oxford et Palcam (cf. infra, paragraphe 4.1.).
4.1.
Milieux de culture
4.1.1. Bouillons d'enrichissement Fraser et Fraser-Demi bioMérieux SA
Ces bouillons sélectifs sont employés dans la recherche de Listeria spp. dans
des produits alimentaires :
-pour l'enrichissement primaire ou pré-enrichissement sélectif en bouillon
Fraser-Demi ;
-pour l'enrichissement secondaire ou phase d’enrichissement en bouillon
Fraser.
Ces deux milieux de culture, pour le pré-enrichissement et l’enrichissement,
sont conformes aux normes NF EN ISO 11290-1/Al (2005) et 11290-2/A1
(2005), NF V 08-055 (1997) pour la recherche de Listeria monocytogenes dans
les aliments.
4.1.1.1. Composition chimique du bouillon Fraser
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu en g/L d’eau purifiée est :
Peptones animales (bovins ou porcins)................................................ 10
Extrait de viande (bovin ou porcin).................................................... 5
Extrait de levure......................................
5
Chlorure de sodium.......................
.20
Substances tampons.................................... ........................
13,35
Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
4.
Recherche et dénombrement
La détection et le dénombrement de Listeria monocytogenes en microbiologie
des aliments peut être réalisée suivant :
— les deux normes NF EN ISO 11290-1/Al et NF EN ISO 11290-2/A1 (2005)
qui utilisent les milieux Fraser et Fraser-Demi comme milieux d’enrichissement
et l'agar Listeria selon Ottaviani et Agosti comme milieu sélectif d’isolement;
- des méthodes alternatives validées par Afnor, en particulier la « méthode
alternative Bio-Rad » utilisant le milieu Rapid’L Mono ou la « méthode alternative ALOA One Day AES Laboratoire » utilisant le milieu ALOA®(Agar Listeria selon Ottaviani et Agosti) (Delarras et Trébaol, 2003) ;
- la méthode présentée dans le document « Food safety » Bio-Rad (2003) qui
se fonde sur les ISO standards 11290-1 et 11290-2 en correspondance avec les
normes ci-dessus.
La norme XP V 08-62 (2000) en microbiologie des aliments présente une
méthode de routine pour le dénombrement de Listeria monocytogenes.
Une détection rapide des Listeria et des L. monocytogenes dans les produits
alimentaires peut aussi être réalisée en utilisant le système VIDAS
bioMérieux® SA. Il utilise les milieux de culture bouillon Fraser et Fraser-Demi.
géloses Oxford et Palcam (cf. infra, paragraphe 4.1.).
4.1.
Milieux de culture
4.1.1. Bouillons d'enrichissement Fraser et Fraser-Demi bioMérieux SA
Ces bouillons sélectifs sont employés dans la recherche de Listeria spp. dans
des produits alimentaires :
-pour l'enrichissement primaire ou pré-enrichissement sélectif en bouillon
Fraser-Demi ;
-pour l'enrichissement secondaire ou phase d’enrichissement en bouillon
Fraser.
Ces deux milieux de culture, pour le pré-enrichissement et l’enrichissement,
sont conformes aux normes NF EN ISO 11290-1/Al (2005) et 11290-2/A1
(2005), NF V 08-055 (1997) pour la recherche de Listeria monocytogenes dans
les aliments.
4.1.1.1. Composition chimique du bouillon Fraser
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu en g/L d’eau purifiée est :
Peptones animales (bovins ou porcins)................................................ 10
Extrait de viande (bovin ou porcin).................................................... 5
Extrait de levure......................................
5
Chlorure de sodium.......................
.20
Substances tampons.................................... ........................
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