Enterobacteriaceae (entérobactéries)
285
► Mode d’action
Le désoxycholate de sodium inhibe les bactéries Gram+.
Le sorbitol (polyalcool) peut être dégradé par des bactéries en produisant des
acides qui font virer le bleu de bromothymol (indicateur de pH) au jaune. Dans
le cas inverse, le milieu de culture conserve sa couleur bleu-vert.
Le thiosulfate de sodium (source de soufre) et le citrate de fer III ammoniacal
interviennent dans le test H2S (cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture
et tests biochimiques pour l’identification bactérienne », paragraphe 3.3.2.).
Le MUG est décomposé par les bactéries possédant la 0-D-glucuronidase
(Escherichia coli) en 4-méthyl-umbelliférone qui produit une fluorescence sous
lumière ultra-violette.
7.13.2 . Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer directement par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le
prélèvement biologique (selles) à analyser.
Incuber à 37 °C pendant 16 à 24 heures.
► En bactériologie alimentaire
Inoculer un échantillon de denrée alimentaire (en général 25 g) dans une fiole
contenant 225 mL de bouillon au sulfate de lauryle VWR™ International
(Merck) (Delarras et Trébaol, 2003). Ce bouillon lactosé, sélectif des coliformes
est utilisé en bactériologie des eaux et des aliments.
Incuber à 37 °C pendant 16 à 24 heures.
À partir du bouillon, ensemencer par isolement des boîtes de Fluorocult®
E.coli O 157 : H7 agar.
7.13.3 . Lecture et interprétation du milieu
Les colonies verdâtres sont sorbitol négatives et présomptives des souches
Escherichia coli O 157 : H7 ; elles sont alors examinées sous lumière ultra-violette pour déceler la présence d’une fluorescence.
Les colonies sorbitol et fluorescence négatifs seront isolées et identifiées a
i I aide d’antisérums spécifiques.
■ Les Proteus (P. mirabilis en particulier) ont des propriétés biochimiques simi= laires à celles d’E. coli O 157 : H7, mais ils s’en différentient en donnant sur ce
■ milieu des colonies brun-noir (H-.S+).
: Les colonies jaunes éventuelles peuvent correspondre à des souches d Esc lu -
; ’hhiacoli, d'Enterobacter... fermentant le sorbitol.
285
► Mode d’action
Le désoxycholate de sodium inhibe les bactéries Gram+.
Le sorbitol (polyalcool) peut être dégradé par des bactéries en produisant des
acides qui font virer le bleu de bromothymol (indicateur de pH) au jaune. Dans
le cas inverse, le milieu de culture conserve sa couleur bleu-vert.
Le thiosulfate de sodium (source de soufre) et le citrate de fer III ammoniacal
interviennent dans le test H2S (cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture
et tests biochimiques pour l’identification bactérienne », paragraphe 3.3.2.).
Le MUG est décomposé par les bactéries possédant la 0-D-glucuronidase
(Escherichia coli) en 4-méthyl-umbelliférone qui produit une fluorescence sous
lumière ultra-violette.
7.13.2 . Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer directement par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le
prélèvement biologique (selles) à analyser.
Incuber à 37 °C pendant 16 à 24 heures.
► En bactériologie alimentaire
Inoculer un échantillon de denrée alimentaire (en général 25 g) dans une fiole
contenant 225 mL de bouillon au sulfate de lauryle VWR™ International
(Merck) (Delarras et Trébaol, 2003). Ce bouillon lactosé, sélectif des coliformes
est utilisé en bactériologie des eaux et des aliments.
Incuber à 37 °C pendant 16 à 24 heures.
À partir du bouillon, ensemencer par isolement des boîtes de Fluorocult®
E.coli O 157 : H7 agar.
7.13.3 . Lecture et interprétation du milieu
Les colonies verdâtres sont sorbitol négatives et présomptives des souches
Escherichia coli O 157 : H7 ; elles sont alors examinées sous lumière ultra-violette pour déceler la présence d’une fluorescence.
Les colonies sorbitol et fluorescence négatifs seront isolées et identifiées a
i I aide d’antisérums spécifiques.
■ Les Proteus (P. mirabilis en particulier) ont des propriétés biochimiques simi= laires à celles d’E. coli O 157 : H7, mais ils s’en différentient en donnant sur ce
■ milieu des colonies brun-noir (H-.S+).
: Les colonies jaunes éventuelles peuvent correspondre à des souches d Esc lu -
; ’hhiacoli, d'Enterobacter... fermentant le sorbitol.