2X4
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
7.1.2.4. Dénombrement
Compter les colonies typiques d'Escherichia coli dans les boîtes contenant
moins de 150 colonies caractéristiques et moins de 300 colonies au total. Pour le
calcul du nombre d'Escherichia coli par mL ou par g d’aliment, consulter les
deux normes NF ISO 16649-1 et 2.
7.1.2.5. Contrôle de qualité du milieu
D'après le contrôle de qualité de ce milieu, la souche Escherichia coli ATCC
25922 donnent des colonies bleues après 18 à 24 heures à 44 °C. Dans les mêmes
conditions, la souche Klebsiella pneumoniae NCTC 11228 se développe avec
des colonies blanches à beige-vert, tandis que la souche Enterococcus faecalis
ATCC 19433 (bactérie Gram+) est inhibée sur ce milieu.
7.13. Fluoroculf E. coli O 157 : H7 agar VWÆ™ International (Merck)
Ce milieu de culture a été conçu pour l’isolement et l’identification des souches d'Escherichia coli entérohémorragiques O 157 : H7 (cf. supra, paragraphe 2.1.1.) à partir des denrées alimentaires ou des prélèvements biologiques.
Les souches d'Escherichia coli O 157 : H7 se différencient des autres souches
d Escherichia coli par deux caractères biochimiques :
-1 absence de capacité à scinder le sorbitol, même après 48 heures
d'incubation ;
— 1 absence de l’enzyme P-glucuronidase, spécifique des Escherichia coli qui
hydrolyse le substrat 4-méthyl-umbelliféryl-P-D-glucuronide (MUG).
7.13.1 . Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu à partir du milieu déshydraté, en suivant les indications du fabricant.
La composition chimique type de ce milieu de culture en g/L d’eau distillée
est :
Peptone de caséine......................................
20
Extrait de viande ......................................
2
Extrait de levure........................................
]
Sorbitol.....................................................
10
Citrate de fer III ammoniacal.....................
0,5
4-méthyl-umbelliféryl-P-D-glucuronide ...................
0,1
Chlorure de sodium ....................................
5
Bleu de bromothymol ..................................
0 025
Désoxycholate de sodium..............................
112
Thiosulfate de sodium ....................................
2
Agar-agar......................................................................
pH 7,4 ± 0,2 à 25 °C
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
7.1.2.4. Dénombrement
Compter les colonies typiques d'Escherichia coli dans les boîtes contenant
moins de 150 colonies caractéristiques et moins de 300 colonies au total. Pour le
calcul du nombre d'Escherichia coli par mL ou par g d’aliment, consulter les
deux normes NF ISO 16649-1 et 2.
7.1.2.5. Contrôle de qualité du milieu
D'après le contrôle de qualité de ce milieu, la souche Escherichia coli ATCC
25922 donnent des colonies bleues après 18 à 24 heures à 44 °C. Dans les mêmes
conditions, la souche Klebsiella pneumoniae NCTC 11228 se développe avec
des colonies blanches à beige-vert, tandis que la souche Enterococcus faecalis
ATCC 19433 (bactérie Gram+) est inhibée sur ce milieu.
7.13. Fluoroculf E. coli O 157 : H7 agar VWÆ™ International (Merck)
Ce milieu de culture a été conçu pour l’isolement et l’identification des souches d'Escherichia coli entérohémorragiques O 157 : H7 (cf. supra, paragraphe 2.1.1.) à partir des denrées alimentaires ou des prélèvements biologiques.
Les souches d'Escherichia coli O 157 : H7 se différencient des autres souches
d Escherichia coli par deux caractères biochimiques :
-1 absence de capacité à scinder le sorbitol, même après 48 heures
d'incubation ;
— 1 absence de l’enzyme P-glucuronidase, spécifique des Escherichia coli qui
hydrolyse le substrat 4-méthyl-umbelliféryl-P-D-glucuronide (MUG).
7.13.1 . Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu à partir du milieu déshydraté, en suivant les indications du fabricant.
La composition chimique type de ce milieu de culture en g/L d’eau distillée
est :
Peptone de caséine......................................
20
Extrait de viande ......................................
2
Extrait de levure........................................
]
Sorbitol.....................................................
10
Citrate de fer III ammoniacal.....................
0,5
4-méthyl-umbelliféryl-P-D-glucuronide ...................
0,1
Chlorure de sodium ....................................
5
Bleu de bromothymol ..................................
0 025
Désoxycholate de sodium..............................
112
Thiosulfate de sodium ....................................
2
Agar-agar......................................................................
pH 7,4 ± 0,2 à 25 °C