Enterobacteriaceae (entérobactéries)
279
6.3.
En bactériologie alimentaire
Diluer l’échantillon d’aliment au 1/10 ou au 1/100 dans un tube de bouillon
ITCou dans un bouillon PSB (cf. supra, paragraphe 6.1.1.).
Incuber à 25 °C pendant 48 heures.
Selon l’origine de l’échantillon, la flore associée est plus ou moins abondante.
Il est donc parfois nécessaire de faire un traitement de 20 secondes à la potasse
à 0,25 % avant d’ensemencer une boîte de gélose CIN.
Ensemencer par étalement de surface une boîte de la gélose CIN (sans traitement) et éventuellement une boîte de la gélose CIN (après traitement).
Incuber les boîtes de milieu à 30 °C pendant 24 à 48 heures, selon le développement des colonies.
Pour la lecture et l’interprétation des colonies : cf. supra, paragraphe 6.2.
7. Identification biochimique
7.1.
Milieux chromogéniques ou fluorogéniques d'identification
pour Escherichia coli
Cf. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des
milieux de culture », paragraphes 4.3.3.2. et 4.3.3.3.
7.1.1. Gélose Coli ID bioMérieux® SA
La gélose Coli ID est un milieu chromogénique sélectif conçu pour la détection et le dénombrement d’Escherichia coli [3-D-glucuronidase positive et des
autres coliformes à partir des aliments.
Elle est validée Afnor par rapport à la méthode normalisée NF ISO 16649-2
(2001 ) pour le dénombrement d'Escherichia coli [3-D-glucuronidase positive.
711.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu de culture, dont la formule théorique
• en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)............................................... 7
Extrait de levure....................................................................................
$
Chlorure de sodium................................................................................ $
Sels biliaires (bovins ou ovins) ..........................................................
Mélange des activateurs.......................................................................
Mélange chromogène...........................................................................
« Agar....................................................................................................... 15
pH 7,2
Ce milieu est disponible en flacons ; suivre les conseils du fabricant pour pré’ P^er les boîtes de Pétri.
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6.3.
En bactériologie alimentaire
Diluer l’échantillon d’aliment au 1/10 ou au 1/100 dans un tube de bouillon
ITCou dans un bouillon PSB (cf. supra, paragraphe 6.1.1.).
Incuber à 25 °C pendant 48 heures.
Selon l’origine de l’échantillon, la flore associée est plus ou moins abondante.
Il est donc parfois nécessaire de faire un traitement de 20 secondes à la potasse
à 0,25 % avant d’ensemencer une boîte de gélose CIN.
Ensemencer par étalement de surface une boîte de la gélose CIN (sans traitement) et éventuellement une boîte de la gélose CIN (après traitement).
Incuber les boîtes de milieu à 30 °C pendant 24 à 48 heures, selon le développement des colonies.
Pour la lecture et l’interprétation des colonies : cf. supra, paragraphe 6.2.
7. Identification biochimique
7.1.
Milieux chromogéniques ou fluorogéniques d'identification
pour Escherichia coli
Cf. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des
milieux de culture », paragraphes 4.3.3.2. et 4.3.3.3.
7.1.1. Gélose Coli ID bioMérieux® SA
La gélose Coli ID est un milieu chromogénique sélectif conçu pour la détection et le dénombrement d’Escherichia coli [3-D-glucuronidase positive et des
autres coliformes à partir des aliments.
Elle est validée Afnor par rapport à la méthode normalisée NF ISO 16649-2
(2001 ) pour le dénombrement d'Escherichia coli [3-D-glucuronidase positive.
711.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu de culture, dont la formule théorique
• en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)............................................... 7
Extrait de levure....................................................................................
$
Chlorure de sodium................................................................................ $
Sels biliaires (bovins ou ovins) ..........................................................
Mélange des activateurs.......................................................................
Mélange chromogène...........................................................................
« Agar....................................................................................................... 15
pH 7,2
Ce milieu est disponible en flacons ; suivre les conseils du fabricant pour pré’ P^er les boîtes de Pétri.