Enterobacteriaceae (entérobactéries)
275
Le thiosulfate de sodium et le citrate de fer ammoniacal permettent le test H,S
(t/. supra, paragraphe 5.2.2.).
La L-Lysine (acide aminé) est décomposée, en présence d’une lysine décarboxylase en cadavérine (amine) et en ammoniac, qui fait virer l’indicateur de pH
au rouge en milieu basique : le test LDC est positif.
5.2.5.1. Ensemencement et incubation du milieu
► Prélèvements biologiques
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le prélèvement
à analyser.
Incuber à l’étuve à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► Produits alimentaires
Cf. supra, paragraphe 5.1.2.
Après un pré-enrichissement en eau peptonée tamponnée et un enrichissement
dans le bouillon RVS et le bouillon MKTTn, ensemencer par isolement deux boîtes de Pétri de gélose XLD (une par bouillon).
Incuber en général les boîtes de Pétri à 37 ± 1 °C pendant 24 ± 3 heures.
► Produits non obligatoirement stériles de la Pharmacopée
Après un pré-enrichissement de l’échantillon, ensemencer par isolement des
boîtes de Pétri de ce milieu et les incuber entre 35 et 37 °C pendant 18 à 72 heures.
5.2.5.2. Lecture et interprétation du milieu
Les différentes colonies, pouvant être observées sur la gélose XLD, sont les
suivantes :
-les colonies de Salmonella sont rose à rouge (LDC+) avec ou sans centre
noir (H2S+ ou —) ;
- les colonies de Shigella sont rose à rouge (LDC+) sans centre noir (H2S-) ;
ï - les colonies jaunes ou orange (sucre+) correspondent à d autres entérobactéries.
5
D après les « limites du test » mentionnées dans la fiche technique de ce
î milieu, on peut, entre autre, noter que :
j -certaines Salmonella enterica subsp. arizonae et Shigella sonnei peuvent
â donner des colonies non caractéristiques (espèces pouvant fermenter le lactose) ;
I- les entérobactéries peuvent présenter des colonies caractéristiques de Salmonella ou Shigella ; il est donc nécessaire de réaliser une identification complète
. Par des tests complémentaires.
Observer les colonies typiques de Salmonella. Sélectionner plusieurs d entre
; elles (cinq en général) suivant la norme à appliquer et procéder à leui identificah°n biochimique et immunologique.
275
Le thiosulfate de sodium et le citrate de fer ammoniacal permettent le test H,S
(t/. supra, paragraphe 5.2.2.).
La L-Lysine (acide aminé) est décomposée, en présence d’une lysine décarboxylase en cadavérine (amine) et en ammoniac, qui fait virer l’indicateur de pH
au rouge en milieu basique : le test LDC est positif.
5.2.5.1. Ensemencement et incubation du milieu
► Prélèvements biologiques
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le prélèvement
à analyser.
Incuber à l’étuve à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► Produits alimentaires
Cf. supra, paragraphe 5.1.2.
Après un pré-enrichissement en eau peptonée tamponnée et un enrichissement
dans le bouillon RVS et le bouillon MKTTn, ensemencer par isolement deux boîtes de Pétri de gélose XLD (une par bouillon).
Incuber en général les boîtes de Pétri à 37 ± 1 °C pendant 24 ± 3 heures.
► Produits non obligatoirement stériles de la Pharmacopée
Après un pré-enrichissement de l’échantillon, ensemencer par isolement des
boîtes de Pétri de ce milieu et les incuber entre 35 et 37 °C pendant 18 à 72 heures.
5.2.5.2. Lecture et interprétation du milieu
Les différentes colonies, pouvant être observées sur la gélose XLD, sont les
suivantes :
-les colonies de Salmonella sont rose à rouge (LDC+) avec ou sans centre
noir (H2S+ ou —) ;
- les colonies de Shigella sont rose à rouge (LDC+) sans centre noir (H2S-) ;
ï - les colonies jaunes ou orange (sucre+) correspondent à d autres entérobactéries.
5
D après les « limites du test » mentionnées dans la fiche technique de ce
î milieu, on peut, entre autre, noter que :
j -certaines Salmonella enterica subsp. arizonae et Shigella sonnei peuvent
â donner des colonies non caractéristiques (espèces pouvant fermenter le lactose) ;
I- les entérobactéries peuvent présenter des colonies caractéristiques de Salmonella ou Shigella ; il est donc nécessaire de réaliser une identification complète
. Par des tests complémentaires.
Observer les colonies typiques de Salmonella. Sélectionner plusieurs d entre
; elles (cinq en général) suivant la norme à appliquer et procéder à leui identificah°n biochimique et immunologique.