Enterobacteriaceae (entérobactéries)
273
5.23.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu :
- directement à partir du prélèvement biologique à analyser ;
- et indirectement après enrichissement dans un bouillon au sélénite (cf.
supra, paragraphe 5.1.1.) ou autre.
Incuber à 37 °C en aérobiose pendant 18 à 24 heures.
► En bactériologie alimentaire
Cf. supra, paragraphe 5.1.2.
Le deuxième milieu sélectif pour Salmonella laissé au choix du laboratoire
peut être la gélose SM ID 2. Ensemencer en stries deux boîtes de Pétri et incuber
entre 35 et 37 °C en aérobiose pendant 18 à 24 heures ou à 37 ± 1 °C pendant
24 ± 3 heures (selon la norme).
5.23.3. Lecture et interprétation du milieu
• Les colonies rose pâle à mauve sont caractéristiques de Salmonella, y
compris des Salmonella lactose+. Cependant, les principales « limites du test »,
mentionnées dans la fiche technique du milieu de culture sont les suivantes :
- «lors de la croissance de certains micro-organismes, des précipités blancs
peuvent être observés. Ces précipités ne présentent pas l'aspect caractéristique
des colonies de Salmonella ;
- certains sérotypes de Salmonella (en particulier Salmonella Dublin. Salmonella Abortusovis, Salmonella Gallinarum) peuvent présenter une coloration faible
ou tardive ;
- certains bacilles Gram— autres que Salmonella peuvent présenter des colonies caractéristiques. Il est donc nécessaire de réaliser une identification
complète par des tests complémentaires ;
- certaines selles peuvent contenir des estérases libres susceptibles de provoquer l'apparition d’une coloration rose à mauve de la gélose au point
d’inoculation ;
- le développement est fonction des exigences propres à chaque micro-orgai nisme. Il est donc possible que certaines souches de Salmonella ayant des exi! gences spécifiques ne se développent pas » ;
• Les autres souches bactériennes se développent avec des colonies de
। couleurs différentes.
। • Observer sur les boîtes de gélose SM ID 2 les colonies typiques de
s ^‘^nonella. Sélectionner cinq d'entre elles et procéder a leur identification
« biochimique et/ou immunologique.
273
5.23.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu :
- directement à partir du prélèvement biologique à analyser ;
- et indirectement après enrichissement dans un bouillon au sélénite (cf.
supra, paragraphe 5.1.1.) ou autre.
Incuber à 37 °C en aérobiose pendant 18 à 24 heures.
► En bactériologie alimentaire
Cf. supra, paragraphe 5.1.2.
Le deuxième milieu sélectif pour Salmonella laissé au choix du laboratoire
peut être la gélose SM ID 2. Ensemencer en stries deux boîtes de Pétri et incuber
entre 35 et 37 °C en aérobiose pendant 18 à 24 heures ou à 37 ± 1 °C pendant
24 ± 3 heures (selon la norme).
5.23.3. Lecture et interprétation du milieu
• Les colonies rose pâle à mauve sont caractéristiques de Salmonella, y
compris des Salmonella lactose+. Cependant, les principales « limites du test »,
mentionnées dans la fiche technique du milieu de culture sont les suivantes :
- «lors de la croissance de certains micro-organismes, des précipités blancs
peuvent être observés. Ces précipités ne présentent pas l'aspect caractéristique
des colonies de Salmonella ;
- certains sérotypes de Salmonella (en particulier Salmonella Dublin. Salmonella Abortusovis, Salmonella Gallinarum) peuvent présenter une coloration faible
ou tardive ;
- certains bacilles Gram— autres que Salmonella peuvent présenter des colonies caractéristiques. Il est donc nécessaire de réaliser une identification
complète par des tests complémentaires ;
- certaines selles peuvent contenir des estérases libres susceptibles de provoquer l'apparition d’une coloration rose à mauve de la gélose au point
d’inoculation ;
- le développement est fonction des exigences propres à chaque micro-orgai nisme. Il est donc possible que certaines souches de Salmonella ayant des exi! gences spécifiques ne se développent pas » ;
• Les autres souches bactériennes se développent avec des colonies de
। couleurs différentes.
। • Observer sur les boîtes de gélose SM ID 2 les colonies typiques de
s ^‘^nonella. Sélectionner cinq d'entre elles et procéder a leur identification
« biochimique et/ou immunologique.