Enterobacteriaceae (entérobactéries)
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5.2.2.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu :
-directement à partir de selles liquides ou d’une suspension de selles en eau
physiologique à 8,5 % en NaCl ;
-indirectement à partir d’un bouillon d’enrichissement pour Salmonella
(cf. supra, paragraphe 5.1.).
Incuber à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► En bactériologie alimentaire
Cf. supra, paragraphes 5.1.2. et 5.1.3.
Incuber en général les boîtes de Pétri à 37 ± 1 °C pendant 24 ± 3 heures.
Observer les colonies typiques de Salmonella. Sélectionner cinq d'entre elles
et procéder à leur identification biochimique et/ou immunologique.
5.2.23. Lecture et interprétation du milieu
La couleur des colonies observées après incubation sur la gélose Hektoen. les
résultats des tests « sucre » et H2S sont donnés dans le tableau 93 pour les Salmonella et autres entérobactéries d’après plusieurs sources.
Parmi les « limites du test » de ce milieu , on peut noter que :
-certaines souches de Salmonella et Shigella ayant des exigences spécifiques
ne se développent pas ;
-certaines Salmonella enterica subsp. arizonae et certaines Shigella sonnei
peuvent donner des colonies non caractéristiques (espèces pouvant fermenter le
lactose).
Tableau 93 ■ Couleur des colonies sur la gélose Hektoën.
Couleur des colonies
Tests « sucre » et H2S
Espèces bactériennes
Jaune à jaune-saumon
Au moins un sucre fermenté
Coliformes :
Escherichia. Citrobacter,
Klebsiella. Enterobacter
Jaune à jaune-saumon
centre noir
Au moins un sucre fermenté,
H2S+
Proteus vulgaris
Vert à bleu-vert
centre noir
SucreP rot eus mirabilis
Salmonella
Vert
centre noir
H2S+
Salmonella Typhimurium
ATCC I4O281
Vert à bleu-vert
SucreMorganella morganii
Providencia
Salmonella (H2S—)
Shigella
1 APrès incubation de 33 à 37 °C pendant 24 heures en contrôle de qualité du milieu.