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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
5.2.2. Gélose Hektoen
La gélose Hektoen bioMérieux® SA est un milieu d’isolement sélectif et de
différentiation pour la recherche des Salmonella et Shigella en bactériologie clinique. Elle est utilisée pour la recherche des Salmonella dans les produits alimentaires, conformément aux normes NF EN ISO 6579 (2002), NF EN 12824 (1998)
et NFV 08-052 (1997).
5.2.2.1. Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de viande (bovin ou porcin).................................................. 12
Extrait de levure.................................................................................... 3
Sels biliaires (bovin ou ovin)............................................................... 9
Lactose (bovin) .................................................................................... 12
Saccharose ............................................................................................. 12
Salicine................................................................................................... 2
Chlorure de sodium................................................................................ 5
Hyposulfite de sodium.........................................................................
5
Citrate de fer ammoniacal.....................................................................
1,5
Bleu de bromothymol .........................................................................
0,064
Fuchsine acide ...................................................................................... 0,040
Agar....................................................................................................... 13,5
pH 7,6
Le milieu préparé à partir du milieu déshydraté ne doit pas être autoclavé. Il
est également disponible en flacons et en boîtes de Pétri prêts à l’emploi.
Laisser les boîtes revenir à température ambiante avant usage.
► Mode d'action
Les sels biliaires inhibent les bactéries à Gram+ et quelques bactéries Gram-.
Le lactose et le saccharose sont des disaccharides ; la salicine est le glucoside
de la saligénine (alcool salicylique + glucose). Ces trois « sucres » peuvent être
fermentées par certaines entérobactéries en produisant des acides qui font virer
le bleu de bromothymol et la fuchsine acide (indicateurs colorés) au jaunesaumon : test « sucre »+ ; dans le cas contraire, la coloration est bleu-vert : test
« sucre »—.
La peptone de viande et éventuellement le thiosulfate de sodium constituent
deux sources de soufre. Le soufre peut être réduit par certaines entérobactéries
en H ,S . ce dernier réagit avec le citrate de fer ammoniacal du milieu pour donner
du sulfure de fer qui colore en noir le centre des colonies (cf. première partiechapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification
bactérienne >», paragraphe 3.3.2.).
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
5.2.2. Gélose Hektoen
La gélose Hektoen bioMérieux® SA est un milieu d’isolement sélectif et de
différentiation pour la recherche des Salmonella et Shigella en bactériologie clinique. Elle est utilisée pour la recherche des Salmonella dans les produits alimentaires, conformément aux normes NF EN ISO 6579 (2002), NF EN 12824 (1998)
et NFV 08-052 (1997).
5.2.2.1. Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de viande (bovin ou porcin).................................................. 12
Extrait de levure.................................................................................... 3
Sels biliaires (bovin ou ovin)............................................................... 9
Lactose (bovin) .................................................................................... 12
Saccharose ............................................................................................. 12
Salicine................................................................................................... 2
Chlorure de sodium................................................................................ 5
Hyposulfite de sodium.........................................................................
5
Citrate de fer ammoniacal.....................................................................
1,5
Bleu de bromothymol .........................................................................
0,064
Fuchsine acide ...................................................................................... 0,040
Agar....................................................................................................... 13,5
pH 7,6
Le milieu préparé à partir du milieu déshydraté ne doit pas être autoclavé. Il
est également disponible en flacons et en boîtes de Pétri prêts à l’emploi.
Laisser les boîtes revenir à température ambiante avant usage.
► Mode d'action
Les sels biliaires inhibent les bactéries à Gram+ et quelques bactéries Gram-.
Le lactose et le saccharose sont des disaccharides ; la salicine est le glucoside
de la saligénine (alcool salicylique + glucose). Ces trois « sucres » peuvent être
fermentées par certaines entérobactéries en produisant des acides qui font virer
le bleu de bromothymol et la fuchsine acide (indicateurs colorés) au jaunesaumon : test « sucre »+ ; dans le cas contraire, la coloration est bleu-vert : test
« sucre »—.
La peptone de viande et éventuellement le thiosulfate de sodium constituent
deux sources de soufre. Le soufre peut être réduit par certaines entérobactéries
en H ,S . ce dernier réagit avec le citrate de fer ammoniacal du milieu pour donner
du sulfure de fer qui colore en noir le centre des colonies (cf. première partiechapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification
bactérienne >», paragraphe 3.3.2.).