Enterobacteriaceae (entérobactéries)
269
► Mode d’action
Les sels biliaires, le citrate de sodium et le vert brillant (colorant) inhibent les
bactéries à Gram+ ; le citrate et le thiosulfate de sodium diminuent le développement des coliformes et Proteus.
Le lactose (disaccharide) peut être utilisé par des coliformes, mais il ne l’est
pas en général par les Salmonella et Shigella. La fermentation de ce sucre libère
des acides qui font virer le rouge neutre (indicateur de pH) au rose à rouge en
milieu acide.
Le thiosulfate de sodium est réduit, en présence d’une réductase, en H,S, qui
réagit avec le citrate de fer pour produire du sulfure de fer ; ce dernier colore en
noir le centre des colonies, qui sont dites H2S+.
5.2.1.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri :
- soit directement avec le prélèvement à analyser ;
-soit indirectement après un enrichissement préalable sur un bouillon d'enrichissement pour ces germes si l’isolement direct n’a donné aucune colonie après
incubation (cf. supra, paragraphe 5.1.).
Incuber à 37 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures.
5.2.13. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation, observer la couleur des colonies développées dont l'interprétation est rapportée dans le tableau 92. Certaines souches de Shigella peuvent
ne pas se développer.
S
î
!
5
Tableau 92 ■ Couleur des colonies sur la gélose SS.
Couleur des colonies
Test lactose
Espèces bactériennes
Rose à rouge
Lactose+
Escherichia coli ATCC 259221 [inhibition
partielle]
Enterobacter aerogenes ATCC 1.30481
Klebsiella
Shigella sonnei ATCC 25931 '
Incolores3, transparentes
LactoseSalmonella, Shigella, autres entérobactéries
Incolores3, à centre noir
LactoseH,S+
Salmonella spp., Salmonella Enteritidis
ATCC 13076'
Proteus vulgaris1
Proteus mirabilis ATCC 259331 '
Après 24 à 48 heures d’incubation à 37 °C en contrôle qualité du milieu.
* Pas d'envahissement du milieu.
n réalité couleur beige (comme celle d’une gélose nutritive).
^■2.1.4. Contrôle de qualité du milieu
Ef. supra, tableau 92. La souche Enterococcus faecalis var. zymogenes A FC C
29212 ne se développe pas sur la gélose SS.
269
► Mode d’action
Les sels biliaires, le citrate de sodium et le vert brillant (colorant) inhibent les
bactéries à Gram+ ; le citrate et le thiosulfate de sodium diminuent le développement des coliformes et Proteus.
Le lactose (disaccharide) peut être utilisé par des coliformes, mais il ne l’est
pas en général par les Salmonella et Shigella. La fermentation de ce sucre libère
des acides qui font virer le rouge neutre (indicateur de pH) au rose à rouge en
milieu acide.
Le thiosulfate de sodium est réduit, en présence d’une réductase, en H,S, qui
réagit avec le citrate de fer pour produire du sulfure de fer ; ce dernier colore en
noir le centre des colonies, qui sont dites H2S+.
5.2.1.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri :
- soit directement avec le prélèvement à analyser ;
-soit indirectement après un enrichissement préalable sur un bouillon d'enrichissement pour ces germes si l’isolement direct n’a donné aucune colonie après
incubation (cf. supra, paragraphe 5.1.).
Incuber à 37 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures.
5.2.13. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation, observer la couleur des colonies développées dont l'interprétation est rapportée dans le tableau 92. Certaines souches de Shigella peuvent
ne pas se développer.
S
î
!
5
Tableau 92 ■ Couleur des colonies sur la gélose SS.
Couleur des colonies
Test lactose
Espèces bactériennes
Rose à rouge
Lactose+
Escherichia coli ATCC 259221 [inhibition
partielle]
Enterobacter aerogenes ATCC 1.30481
Klebsiella
Shigella sonnei ATCC 25931 '
Incolores3, transparentes
LactoseSalmonella, Shigella, autres entérobactéries
Incolores3, à centre noir
LactoseH,S+
Salmonella spp., Salmonella Enteritidis
ATCC 13076'
Proteus vulgaris1
Proteus mirabilis ATCC 259331 '
Après 24 à 48 heures d’incubation à 37 °C en contrôle qualité du milieu.
* Pas d'envahissement du milieu.
n réalité couleur beige (comme celle d’une gélose nutritive).
^■2.1.4. Contrôle de qualité du milieu
Ef. supra, tableau 92. La souche Enterococcus faecalis var. zymogenes A FC C
29212 ne se développe pas sur la gélose SS.