Enterohacteriaceae (entérobactéries)
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42.4.4. Contrôle de qualité du milieu
Les souches d’Escherichia coli ATCC 25922, ATTCC 11775 et 194 se développent bien sur le milieu, avec des colonies bleues à éclat métallique, alors que
Enterobacter cloacae ATCC 13047 produit des colonies bleutées sans éclat.
Les souches de Shigella sonnei ATCC 11060, de Salmonella Typhimurium
ATCC 14028 et de Proteus mirabilis ATCC 14273 donnent des colonies incolores
et sans éclat métallique.
4.2.5. Gélose VRBGL
La gélose VRBGL bioMérieux® SA est un milieu sélectif d’isolement des
entérobactéries et autres bactéries Gram- Elle correspond au milieu gélosé F de
la Pharmacopée européenne 4.2. (cf. annexe générale 7 « Milieux utilisés en
Pharmacopée ») et elle est utilisé pour la recherche de ces germes dans les produits pharmaceutiques non stériles.
42.5.1. Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu de culture dont la composition type
en g/L d’eau distillée est :
Extrait de levure....................................................................................
3
Hydrolysat pancréatique de gélatine (bovin ou porcin)...................
7
Sels biliaires (bovin ou ovin)..............................................................
L5
Lactose monohydraté (bovin) ............................................................ 10
Glucose monohydraté ......................................................................... 10
Chlorure de sodium .............................................................................. 5
Agar....................................................................................................... 15
Rouge neutre ......................................................................................... 30 mg
Cristal violet........................................................................................... 2 mg
pH 7,4
Ce milieu est disponible en boîtes de Pétri prêtes à l’emploi..
► Mode d’action
Les sels biliaires et le cristal violet inhibent les bactéries à Gram+.
Les bactéries fermentant le glucose et/ou le lactose libèrent des acides qui font
virer le rouge neutre (indicateur de pH) au rouge en milieu acide. Ce dernier est
incolore en milieu basique.
42.5.2. Ensemencement et incubation du milieu
Suite des paragraphes supra 4.1.1. et 4.1.2.
Étaler à la surface d’une boîte de gélose VRBGL 0,1 mL. au moins, d échantillon préparé à partir du bouillon Mossel et préparer deux boîtes de Pétri, au
moins, par dilution.
Incuber les boîtes entre 35 et 37 °C pendant 24 heures.
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42.4.4. Contrôle de qualité du milieu
Les souches d’Escherichia coli ATCC 25922, ATTCC 11775 et 194 se développent bien sur le milieu, avec des colonies bleues à éclat métallique, alors que
Enterobacter cloacae ATCC 13047 produit des colonies bleutées sans éclat.
Les souches de Shigella sonnei ATCC 11060, de Salmonella Typhimurium
ATCC 14028 et de Proteus mirabilis ATCC 14273 donnent des colonies incolores
et sans éclat métallique.
4.2.5. Gélose VRBGL
La gélose VRBGL bioMérieux® SA est un milieu sélectif d’isolement des
entérobactéries et autres bactéries Gram- Elle correspond au milieu gélosé F de
la Pharmacopée européenne 4.2. (cf. annexe générale 7 « Milieux utilisés en
Pharmacopée ») et elle est utilisé pour la recherche de ces germes dans les produits pharmaceutiques non stériles.
42.5.1. Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
► Composition chimique
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu de culture dont la composition type
en g/L d’eau distillée est :
Extrait de levure....................................................................................
3
Hydrolysat pancréatique de gélatine (bovin ou porcin)...................
7
Sels biliaires (bovin ou ovin)..............................................................
L5
Lactose monohydraté (bovin) ............................................................ 10
Glucose monohydraté ......................................................................... 10
Chlorure de sodium .............................................................................. 5
Agar....................................................................................................... 15
Rouge neutre ......................................................................................... 30 mg
Cristal violet........................................................................................... 2 mg
pH 7,4
Ce milieu est disponible en boîtes de Pétri prêtes à l’emploi..
► Mode d’action
Les sels biliaires et le cristal violet inhibent les bactéries à Gram+.
Les bactéries fermentant le glucose et/ou le lactose libèrent des acides qui font
virer le rouge neutre (indicateur de pH) au rouge en milieu acide. Ce dernier est
incolore en milieu basique.
42.5.2. Ensemencement et incubation du milieu
Suite des paragraphes supra 4.1.1. et 4.1.2.
Étaler à la surface d’une boîte de gélose VRBGL 0,1 mL. au moins, d échantillon préparé à partir du bouillon Mossel et préparer deux boîtes de Pétri, au
moins, par dilution.
Incuber les boîtes entre 35 et 37 °C pendant 24 heures.