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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Mode d'action
L'interprétation est semblable à la gélose EMB, mais avec du lactose uniquement (cf. supra, paragraphe 4.2.3.3.).
Ce milieu de culture peut être additionné de chlorhydrate de tétracycline, antibiotique de la famille des tétracyclines, à spectre large, qui inhibe de nombreuses
espèces bactériennes Gram+ et Gram- Il est alors utilisable pour l’identification
rapide de Candida albicans (cf. deuxième partie, chapitre 7 « Levures et
moisissures », paragraphe 5.1.).
Ce milieu peut aussi être employé pour mettre en évidence les staphylocoques
à coagulase positive, cocci à Gram-i- non inhibés par les deux colorants. D'après
Menoiasino et al. (1960), les staphylocoques présentent des colonies caractéristiques, incolores, en « tête d’épingle », qui ont une bonne concordance avec le
test coagulase (cf. deuxième partie, chapitre 9 « Staphylococcus, Micrococcus et
ex-Micrococcus, paragraphe 6.1.1.).
► Remarque
En 1960, la seule espèce coagulase positive connue était Staphylococcus
aureus. Par ailleurs, la souche de Staphylococcus aureus ATCC 25923 testée
dans le contrôle qualité de ce milieu ne se développe pas.
42.4.2. Ensemencement et incubation du milieu
• Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le prélèvement à analyser. Incuber en aérobiose à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
• Pour les boîtes de Pétri de ce milieu supplémenté en chlorhydrate de
tétracycline pour une culture primaire de Candida, incuber à 37 °C pendant 24 à
48 heures sous atmosphère de CO2 à 10 % (cf. première partie, chapitre 2
« Matériel principal du laboratoire de microbiologie », paragraphe 1.2.4.).
42.4.3. Lecture et interprétation du milieu
L aspect et la couleur des colonies obtenus sur ce milieu sont présentés dans
le tableau 91 d'après la fiche technique Merck.
Tableau 9/ ■ Aspect et couleur des colonies sur le milieu « Agar lactosé à 1 éosine et
au bleu de méthylène selon Levine ».
Aspect et couleur des colonies
Lactose
Micro-organismes
Colonies de diamètre 2 à 3 mm, éclat métallique
verdâtre par réflexion, couleur sombre à noire
par transparence
+
Escherichia coli
< olomes de diamètre 4 à 6 mm, centre gris à marron
par transparence, pas d’éclat métallique
+
Enterobacter
Colonies transparentes, ambrées
—
Salmonella et Shigella_
Colonies incolores en « tête d’épingle »
—
Staphylocoques coagulase+_
colonies en forme de toile d’araignée ou de plume
Candida albicans
Colonies semblables aux levures, circulaires, lisses
Autres souches de Candida.
parfois Nocardia .__
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Mode d'action
L'interprétation est semblable à la gélose EMB, mais avec du lactose uniquement (cf. supra, paragraphe 4.2.3.3.).
Ce milieu de culture peut être additionné de chlorhydrate de tétracycline, antibiotique de la famille des tétracyclines, à spectre large, qui inhibe de nombreuses
espèces bactériennes Gram+ et Gram- Il est alors utilisable pour l’identification
rapide de Candida albicans (cf. deuxième partie, chapitre 7 « Levures et
moisissures », paragraphe 5.1.).
Ce milieu peut aussi être employé pour mettre en évidence les staphylocoques
à coagulase positive, cocci à Gram-i- non inhibés par les deux colorants. D'après
Menoiasino et al. (1960), les staphylocoques présentent des colonies caractéristiques, incolores, en « tête d’épingle », qui ont une bonne concordance avec le
test coagulase (cf. deuxième partie, chapitre 9 « Staphylococcus, Micrococcus et
ex-Micrococcus, paragraphe 6.1.1.).
► Remarque
En 1960, la seule espèce coagulase positive connue était Staphylococcus
aureus. Par ailleurs, la souche de Staphylococcus aureus ATCC 25923 testée
dans le contrôle qualité de ce milieu ne se développe pas.
42.4.2. Ensemencement et incubation du milieu
• Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le prélèvement à analyser. Incuber en aérobiose à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
• Pour les boîtes de Pétri de ce milieu supplémenté en chlorhydrate de
tétracycline pour une culture primaire de Candida, incuber à 37 °C pendant 24 à
48 heures sous atmosphère de CO2 à 10 % (cf. première partie, chapitre 2
« Matériel principal du laboratoire de microbiologie », paragraphe 1.2.4.).
42.4.3. Lecture et interprétation du milieu
L aspect et la couleur des colonies obtenus sur ce milieu sont présentés dans
le tableau 91 d'après la fiche technique Merck.
Tableau 9/ ■ Aspect et couleur des colonies sur le milieu « Agar lactosé à 1 éosine et
au bleu de méthylène selon Levine ».
Aspect et couleur des colonies
Lactose
Micro-organismes
Colonies de diamètre 2 à 3 mm, éclat métallique
verdâtre par réflexion, couleur sombre à noire
par transparence
+
Escherichia coli
< olomes de diamètre 4 à 6 mm, centre gris à marron
par transparence, pas d’éclat métallique
+
Enterobacter
Colonies transparentes, ambrées
—
Salmonella et Shigella_
Colonies incolores en « tête d’épingle »
—
Staphylocoques coagulase+_
colonies en forme de toile d’araignée ou de plume
Candida albicans
Colonies semblables aux levures, circulaires, lisses
Autres souches de Candida.
parfois Nocardia .__