Enterobacteriaceae (entérobactéries)
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4233. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation sur ce milieu de culture :
- les colonies violet foncé présentant un reflet métallique sont lactose et/ou
saccharose+ : elles correspondent principalement à Escherichia coli ;
- les colonies incolores ou légèrement rosées sont lactose- et saccharose- :
elles sont présomptives de Salmonella et de Shigella.
Les colonies observées doivent être identifiées par des tests biochimiques et
éventuellement immunologiques.
423.4. Contrôle de qualité du milieu
Pour contrôler la fertilité du milieu, la souche Escherichia coli ATCC 25922
est utilisée. Après 24 heures d’incubation à 37 °C, elle produit des colonies violet
foncé avec reflets métalliques.
4.2.4. Gélose EM B (avec lactose)
Le nom de cette gélose vient de la formule « Eosine Methylene-blue Lactose
Agar according to Levine » ou « Levine Agar EM B », conçue par Levine (1918,
1921) pour isoler Escherichia coli et Enterobacter et pour identifier Candida
albicans. Ce milieu ne contient qu’un seul sucre, le lactose.
Le milieu Agar lactosé à l’éosine et au bleu de méthylène selon Levine
VWRTM International (Merck) répond à cette formule. Il est conforme aux recommandations du Standard Methods for the examination water (APHAJ998) et
I United States Pharmacopeia XXVI (2003).
Pour son utilisation en cosmétologie, cf. deuxième partie, chapitre 11
«Contrôle microbiologique des produits cosmétiques », paragraphe 4.3.1.2.
42.4.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
I
3
I
Préparer des boîtes de Pétri de ce milieu de culture dont la composition type
en g/L d’eau distillée est :
Peptone................................................................................................... 10
Lactose................................................................................................... 10
Phosphate dipotassique............................................................................
2
Éosine jaunâtre......................................................................................
0.4
Bleu de méthylène ................................................................................ 0,065
Agar-agar................................................................................................. 13,5
pH 7,0 ±0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 121 °C
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté.
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