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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Les colonies d'Escherichia coli ou autres entérobactéries détectées doivent
être prélevées en vue d'une identification biochimique et éventuellement sérologique.
4.2.2.4. Contrôle de qualité du milieu
Pour contrôler la fertilité du milieu, les souches Escherichia coli ATCC 25922
et Salmonella Typhimurium ATCC 14028 peuvent être utilisées.
Après 24 heures d’incubation de 33 à 37 °C, la première souche produit des
colonies roses et la deuxième souche des colonies incolores.
4.2.3. Gélose EM B (avec lactose et saccharose)
La gélose EMB bioMérieux® SA est un milieu d’isolement sélectif utilisé pour
la recherche des entérobactéries en bactériologie médicale (selles, urines ou
autres prélèvements biologiques).
4.2.3.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)................................................ 10
Lactose (bovin)...................................................................................... 5
Saccharose.................................................................................................
5
Phosphate bipotassique .......................................................................... 2
Éosine..................................................................................................... 0,4
Bleu de méthylène ................................ .............................................. 0,065
Agar........................................................................................................... 13,5
pH 7,2
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté, en flacons ou en boîtes de Pétri,
prêts à l'emploi. Laisser les boîtes revenir à la température ambiante avant usage.
► Mode d'action
L éosine et le bleu de méthylène sont deux colorants de microbiologie inhibiteurs de bactéries à Gram+. Le bleu de méthylène sert également d'indicateur
d oxydoréduction, bleu à l'état oxydé et incolore lorsqu'il est réduit. L’interpré- ।
talion est complexe, mais l’utilisation du lactose et/ou du saccharose par des
entérobactéries libère des acides et s’exprime en présence des deux colorants par ;
des colonies de couleur violette.
4.2.3.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le prélèvement
à analyser. Incuber à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Les colonies d'Escherichia coli ou autres entérobactéries détectées doivent
être prélevées en vue d'une identification biochimique et éventuellement sérologique.
4.2.2.4. Contrôle de qualité du milieu
Pour contrôler la fertilité du milieu, les souches Escherichia coli ATCC 25922
et Salmonella Typhimurium ATCC 14028 peuvent être utilisées.
Après 24 heures d’incubation de 33 à 37 °C, la première souche produit des
colonies roses et la deuxième souche des colonies incolores.
4.2.3. Gélose EM B (avec lactose et saccharose)
La gélose EMB bioMérieux® SA est un milieu d’isolement sélectif utilisé pour
la recherche des entérobactéries en bactériologie médicale (selles, urines ou
autres prélèvements biologiques).
4.2.3.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)................................................ 10
Lactose (bovin)...................................................................................... 5
Saccharose.................................................................................................
5
Phosphate bipotassique .......................................................................... 2
Éosine..................................................................................................... 0,4
Bleu de méthylène ................................ .............................................. 0,065
Agar........................................................................................................... 13,5
pH 7,2
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté, en flacons ou en boîtes de Pétri,
prêts à l'emploi. Laisser les boîtes revenir à la température ambiante avant usage.
► Mode d'action
L éosine et le bleu de méthylène sont deux colorants de microbiologie inhibiteurs de bactéries à Gram+. Le bleu de méthylène sert également d'indicateur
d oxydoréduction, bleu à l'état oxydé et incolore lorsqu'il est réduit. L’interpré- ।
talion est complexe, mais l’utilisation du lactose et/ou du saccharose par des
entérobactéries libère des acides et s’exprime en présence des deux colorants par ;
des colonies de couleur violette.
4.2.3.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer par isolement des boîtes de Pétri de ce milieu avec le prélèvement
à analyser. Incuber à 37 °C pendant 24 à 48 heures.