Enterobacteriaceae (entérobactéries)
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4.2.2.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)............................................... 17
Peptone de viande (bovin ou porcin).................................................
3
Lactose (bovin)...................................................................................... 10
Sels biliaires (ovin ou bovin)..............................................................
1,5
Chlorure de sodium .............................................................................. 5
Agar......................................................................................................... 13,5
Rouge neutre ......................................................................................... 0,03
Cristal violet........................................................................................... 0,01
pH 7,1
Ce milieu est disponible en boîtes de Pétri prêtes à l’emploi. Les laisser revenir
à température ambiante avant emploi.
► Mode d’action
Les sels biliaires et le cristal violet (colorant) inhibent les bactéries à Gram+.
Comme dans la gélose de Drigalski, le lactose du milieu peut être fermenté ou
non par les bactéries. Ici, l’indicateur de pH est le rouge neutre, rose à rouge en
milieu acide et incolore en milieu basique. Dans ce dernier cas, le milieu de culture et les colonies ont la couleur beige d’une gélose nutritive.
4.2.2.2. Ensemencement et incubation du milieu
► Prélèvements biologiques (urines...)
Ensemencer des géloses de Mac Conkey par la méthode des quadrants (technique
des stries) avec le prélèvement. Incuber en général à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► Eaux et produits laitiers
Pour isoler et dénombrer les entérobactéries dans ces produits, consulter le
« Standard Methods for the examination of water and wastewater ».
► Produits pharmaceutiques non obligatoirement stériles (recherche de
micro-organismes spécifiés)
Après enrichissement préalable dans un bouillon de Mac Conkey (cf. première
partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour I identification
bactérienne », paragraphe 2.2.2.1.), ensemencer par isolement des boîtes de gélose
de Mac Conkey au cristal violet. Incuber de 35 à 37 °C pendant 18 à 72 heures.
42.2.3. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation, sur ce milieu de culture :
~ les colonies rose à rouge, parfois entourées d’un halo opaque de sels biliaires
précipités sont lactose+ ;
~ les colonies incolores ou faiblement colorées à beiges sont lactose-.
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4.2.2.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)............................................... 17
Peptone de viande (bovin ou porcin).................................................
3
Lactose (bovin)...................................................................................... 10
Sels biliaires (ovin ou bovin)..............................................................
1,5
Chlorure de sodium .............................................................................. 5
Agar......................................................................................................... 13,5
Rouge neutre ......................................................................................... 0,03
Cristal violet........................................................................................... 0,01
pH 7,1
Ce milieu est disponible en boîtes de Pétri prêtes à l’emploi. Les laisser revenir
à température ambiante avant emploi.
► Mode d’action
Les sels biliaires et le cristal violet (colorant) inhibent les bactéries à Gram+.
Comme dans la gélose de Drigalski, le lactose du milieu peut être fermenté ou
non par les bactéries. Ici, l’indicateur de pH est le rouge neutre, rose à rouge en
milieu acide et incolore en milieu basique. Dans ce dernier cas, le milieu de culture et les colonies ont la couleur beige d’une gélose nutritive.
4.2.2.2. Ensemencement et incubation du milieu
► Prélèvements biologiques (urines...)
Ensemencer des géloses de Mac Conkey par la méthode des quadrants (technique
des stries) avec le prélèvement. Incuber en général à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► Eaux et produits laitiers
Pour isoler et dénombrer les entérobactéries dans ces produits, consulter le
« Standard Methods for the examination of water and wastewater ».
► Produits pharmaceutiques non obligatoirement stériles (recherche de
micro-organismes spécifiés)
Après enrichissement préalable dans un bouillon de Mac Conkey (cf. première
partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour I identification
bactérienne », paragraphe 2.2.2.1.), ensemencer par isolement des boîtes de gélose
de Mac Conkey au cristal violet. Incuber de 35 à 37 °C pendant 18 à 72 heures.
42.2.3. Lecture et interprétation du milieu
Après incubation, sur ce milieu de culture :
~ les colonies rose à rouge, parfois entourées d’un halo opaque de sels biliaires
précipités sont lactose+ ;
~ les colonies incolores ou faiblement colorées à beiges sont lactose-.