Clostridium
239
k Composition chimique du milieu
La formule théorique du bouillon Thioglycolate avec résazurine en g/L d’eau
purifiée est :
Peptone de caséine (bovin)................................................................... 15
L-cystine.................................................................................................
0,5
Glucose anhydre....................................................................................
5
Extrait de levure....................................................................................
5
Chlorure de sodium................................................................................
2,5
Thioglycolate de sodium .....................................................................
0,5
Ou acide thioglycolique.......................................................................
0,3 mL
Résazurine...............................................................................................
0,001
Agar.........................................................................................................
0,75
pH 7,1
Ce milieu de culture est disponible en tubes de 9 mL ou en flacons de 100 mL.
► Mode d’action du milieu
La L-cystine et l’acide thioglycolique, agents réducteurs, et l’extrait de levure
favorisent la croissance des germes aérobies.
La résazurine, indicateur d’oxydoréduction, permet de visualiser la présence
d'oxygène (coloration rose à mauve).
► Ensemencement et incubation du milieu
Appliquer les méthodes de travail décrites dans les Pharmacopées.
► Contrôle de qualité du milieu
La fertilité du milieu est testée avec les souches de Clostridium sporogenes
ATCC 11437 et Staphylococcus aureus ATCC 25923. La première se développe
après 72 heures d’incubation de 30 à 35 °C et la seconde après 24 heures de 33
à 37 °C ; la croissance s’exprime par l’apparition d'un trouble.
4.4.2.
Clostridia thermophiles
Dans le cas de la recherche des Clostridia thermophiles dans des produits
s pharmaceutiques non stériles, la mise en évidence du caractère anaérobie de ces
| germes se fait sur le milieu gélosé Q (gélose Columbia) (cf. première partie, cha= pitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture », parai graphe 4.1.2.3.).
Ensemencer en stries la surface de quatre boîtes de Pétri à partir d une culture
j en milieu liquide.
:
Mettre deux boîtes en culture à 55 ± 1 °C en aérobiose pendant 1 à 4 jours et
i les deux autres en culture à 55 ± 1 °C en anaérobiose pendant 1 à 4 jours.
Observer le développement des Clostridia thermophiles en anaérobiose.
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k Composition chimique du milieu
La formule théorique du bouillon Thioglycolate avec résazurine en g/L d’eau
purifiée est :
Peptone de caséine (bovin)................................................................... 15
L-cystine.................................................................................................
0,5
Glucose anhydre....................................................................................
5
Extrait de levure....................................................................................
5
Chlorure de sodium................................................................................
2,5
Thioglycolate de sodium .....................................................................
0,5
Ou acide thioglycolique.......................................................................
0,3 mL
Résazurine...............................................................................................
0,001
Agar.........................................................................................................
0,75
pH 7,1
Ce milieu de culture est disponible en tubes de 9 mL ou en flacons de 100 mL.
► Mode d’action du milieu
La L-cystine et l’acide thioglycolique, agents réducteurs, et l’extrait de levure
favorisent la croissance des germes aérobies.
La résazurine, indicateur d’oxydoréduction, permet de visualiser la présence
d'oxygène (coloration rose à mauve).
► Ensemencement et incubation du milieu
Appliquer les méthodes de travail décrites dans les Pharmacopées.
► Contrôle de qualité du milieu
La fertilité du milieu est testée avec les souches de Clostridium sporogenes
ATCC 11437 et Staphylococcus aureus ATCC 25923. La première se développe
après 72 heures d’incubation de 30 à 35 °C et la seconde après 24 heures de 33
à 37 °C ; la croissance s’exprime par l’apparition d'un trouble.
4.4.2.
Clostridia thermophiles
Dans le cas de la recherche des Clostridia thermophiles dans des produits
s pharmaceutiques non stériles, la mise en évidence du caractère anaérobie de ces
| germes se fait sur le milieu gélosé Q (gélose Columbia) (cf. première partie, cha= pitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture », parai graphe 4.1.2.3.).
Ensemencer en stries la surface de quatre boîtes de Pétri à partir d une culture
j en milieu liquide.
:
Mettre deux boîtes en culture à 55 ± 1 °C en aérobiose pendant 1 à 4 jours et
i les deux autres en culture à 55 ± 1 °C en anaérobiose pendant 1 à 4 jours.
Observer le développement des Clostridia thermophiles en anaérobiose.