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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
43.2.1. Premier milieu de culture
La gélose TSC (Tiyptone-Sulfite-Cyclosérine) sans cyclosérine (base Bio-Rad)
est un milieu sélectif utilisé pour la recherche et le dénombrement des bactéries
anaérobies sulfitoréductrices dans les produits alimentaires et dans les eaux.
Elle est recommandée dans plusieurs normes ou textes réglementaires :
- en microbiologie des aliments : NF EN ISO 7937 précitée, NF EN ISO
15213 (2003) pour les bactéries sulfitoréductrices..., arrêté du 21 décembre 1979
(JO du 19 janvier 1980) modifié à plusieurs reprises ;
- en microbiologie des eaux: norme PR ISO/CD 6461-2 (2002) pour la
recherche et le dénombrement de Clostridiumperfringens..., directive 98/83/CE
du Conseil du 3 novembre 1998 (cf. Delarras et Trébaol, 2003).
►
Composition chimique du milieu de culture (base)
La formule type de ce milieu de culture en g/L d’eau distillée est :
Peptone..................................................................................................
Peptone de soja...................................................................................... 5
Extrait de levure.................................................................................... 5
Métabisulfite de sodium anhydre (Na2SO5)......................................... 1
Citrate de fer III ammoniacal............................................................... 1
Agar......................................................................................................... 15
pH final 7,6 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l'autoclave : 121 ± 1 °C pendant 15 minutes
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté ou en flacons de 100 mL prêts a
l'emploi. Au moment de l'emploi, la D-cyclosérine, en solution à 4 %, stérilisée par
filtration, est ajoutée à 100 mL de milieu de base liquéfié et ramené entre 44 et 49 °C.
► Mode d'action
La D-cyclosérine est un inhibiteur de bactéries à Gram+ et Gram—, autres que
les Clostridia sulfitoréducteurs.
Le métabisulfite de sodium anhydre est une source de soufre pour les Clostridia sulfitoréducteurs. qui le réduisent en sulfure de fer noir en présence du citrate
de fer III ammoniacal.
L incubation à 46 °C renforce la sélectivité du milieu vis-à-vis de Clostridium
perfringens.
► Autres milieux de culture
I our le contrôle de la qualité hygiénique des aliments, la gélose sulfite de ter
BioMérieux SA est recommandée par la norme NF EN 15213 pour le dénombrement des bactéries anaérobies sulfitoréductrices.
Additionnée de D-cyclosérine, elle est désignée gélose sulfite cyclosérine
(S( ). autrefois appelée tryptose sulfite cyclosérine (TSC) ; elle est utilisée pour
le dénombrement des ( lostridium perfringens conformément aux normes NFEN
ISO 1340L NF EN ISO 7937...
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
43.2.1. Premier milieu de culture
La gélose TSC (Tiyptone-Sulfite-Cyclosérine) sans cyclosérine (base Bio-Rad)
est un milieu sélectif utilisé pour la recherche et le dénombrement des bactéries
anaérobies sulfitoréductrices dans les produits alimentaires et dans les eaux.
Elle est recommandée dans plusieurs normes ou textes réglementaires :
- en microbiologie des aliments : NF EN ISO 7937 précitée, NF EN ISO
15213 (2003) pour les bactéries sulfitoréductrices..., arrêté du 21 décembre 1979
(JO du 19 janvier 1980) modifié à plusieurs reprises ;
- en microbiologie des eaux: norme PR ISO/CD 6461-2 (2002) pour la
recherche et le dénombrement de Clostridiumperfringens..., directive 98/83/CE
du Conseil du 3 novembre 1998 (cf. Delarras et Trébaol, 2003).
►
Composition chimique du milieu de culture (base)
La formule type de ce milieu de culture en g/L d’eau distillée est :
Peptone..................................................................................................
Peptone de soja...................................................................................... 5
Extrait de levure.................................................................................... 5
Métabisulfite de sodium anhydre (Na2SO5)......................................... 1
Citrate de fer III ammoniacal............................................................... 1
Agar......................................................................................................... 15
pH final 7,6 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l'autoclave : 121 ± 1 °C pendant 15 minutes
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté ou en flacons de 100 mL prêts a
l'emploi. Au moment de l'emploi, la D-cyclosérine, en solution à 4 %, stérilisée par
filtration, est ajoutée à 100 mL de milieu de base liquéfié et ramené entre 44 et 49 °C.
► Mode d'action
La D-cyclosérine est un inhibiteur de bactéries à Gram+ et Gram—, autres que
les Clostridia sulfitoréducteurs.
Le métabisulfite de sodium anhydre est une source de soufre pour les Clostridia sulfitoréducteurs. qui le réduisent en sulfure de fer noir en présence du citrate
de fer III ammoniacal.
L incubation à 46 °C renforce la sélectivité du milieu vis-à-vis de Clostridium
perfringens.
► Autres milieux de culture
I our le contrôle de la qualité hygiénique des aliments, la gélose sulfite de ter
BioMérieux SA est recommandée par la norme NF EN 15213 pour le dénombrement des bactéries anaérobies sulfitoréductrices.
Additionnée de D-cyclosérine, elle est désignée gélose sulfite cyclosérine
(S( ). autrefois appelée tryptose sulfite cyclosérine (TSC) ; elle est utilisée pour
le dénombrement des ( lostridium perfringens conformément aux normes NFEN
ISO 1340L NF EN ISO 7937...