Clostridium
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43.1.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En microbiologie des aliments
Pour la préparation de la suspension mère d’un aliment et des dilutions décimales, consulter les normes citées dans la première partie, chapitre 2 « Matériel
principal du laboratoire de microbiologie », paragraphe 3.1.2.
Suivant le principe de la technique de dénombrement en anaérobiose (cf. première
partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.5.) :
- déposer 1 mL de la suspension mère de l’aliment ou du produit (s’il est
liquide) ou d’une dilution décimale, à l’aide d’une pipette stérile, dans deux boîtes de Pétri vides stériles ;
- verser 15 mL de la gélose viande-foie-sulfite-fer maintenue en surfusion
dans un bain-marie thermostaté entre 44 et 47 °C et mélanger soigneusement ;
- après solidification de la gélose, couler une deuxième couche du même
milieu (10 mL).
► Autre technique
Procéder comme ci-dessus, mais en utilisant des tubes de culture. Mélanger
doucement sans provoquer de bulles et laisser solidifier le milieu.
Incuber en jarre anaérobie les boîtes de Pétri à 37 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures ou à 50 ± 1 °C si l’on soupçonne la présence de Clostridia thermophiles dans
l’aliment.
► En microbiologie des eaux
Cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.5., Delarras et Trébaol, 2003).
43.1.3. Lecture et interprétation du milieu
Les colonies entourées d’un halo noir correspondent à des bactéries sulfitoréductrices, provenant de spores thermorésistantes présentes dans l'eau ou dans des aliments à analyser. Elles sont le plus souvent présomptives de Clostridium
ICI. perfringens à 37 °C ou à 46 °C, Cl. sporogenes à 37 °C...) qu'il faut confirmer.
। 13.1.4. Dénombrement
=
Dénombrer les colonies noires de bactéries sulfitoréductrices dans chaque
• boîte contenant moins de 150 colonies typiques et moins de 300 au total.
| Exprimer le résultat par g ou par mL d’aliment en appliquant la norme ISO
î 7218/AL
j ^••^•2. Clostridia sulfitoréducteurs et Clostridium perfringens
-
La détection et le dénombrement des Clostridia, et en particulier de Clostrii diuni perfringens, en microbiologie des aliments, sont fondés sur la norme NF
l EN ISO 7937 (2005), intitulée « Méthode horizontale pour le dénombrement de
Clostridium perfringens — Technique par comptage des colonies ».
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43.1.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En microbiologie des aliments
Pour la préparation de la suspension mère d’un aliment et des dilutions décimales, consulter les normes citées dans la première partie, chapitre 2 « Matériel
principal du laboratoire de microbiologie », paragraphe 3.1.2.
Suivant le principe de la technique de dénombrement en anaérobiose (cf. première
partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.5.) :
- déposer 1 mL de la suspension mère de l’aliment ou du produit (s’il est
liquide) ou d’une dilution décimale, à l’aide d’une pipette stérile, dans deux boîtes de Pétri vides stériles ;
- verser 15 mL de la gélose viande-foie-sulfite-fer maintenue en surfusion
dans un bain-marie thermostaté entre 44 et 47 °C et mélanger soigneusement ;
- après solidification de la gélose, couler une deuxième couche du même
milieu (10 mL).
► Autre technique
Procéder comme ci-dessus, mais en utilisant des tubes de culture. Mélanger
doucement sans provoquer de bulles et laisser solidifier le milieu.
Incuber en jarre anaérobie les boîtes de Pétri à 37 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures ou à 50 ± 1 °C si l’on soupçonne la présence de Clostridia thermophiles dans
l’aliment.
► En microbiologie des eaux
Cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.5., Delarras et Trébaol, 2003).
43.1.3. Lecture et interprétation du milieu
Les colonies entourées d’un halo noir correspondent à des bactéries sulfitoréductrices, provenant de spores thermorésistantes présentes dans l'eau ou dans des aliments à analyser. Elles sont le plus souvent présomptives de Clostridium
ICI. perfringens à 37 °C ou à 46 °C, Cl. sporogenes à 37 °C...) qu'il faut confirmer.
। 13.1.4. Dénombrement
=
Dénombrer les colonies noires de bactéries sulfitoréductrices dans chaque
• boîte contenant moins de 150 colonies typiques et moins de 300 au total.
| Exprimer le résultat par g ou par mL d’aliment en appliquant la norme ISO
î 7218/AL
j ^••^•2. Clostridia sulfitoréducteurs et Clostridium perfringens
-
La détection et le dénombrement des Clostridia, et en particulier de Clostrii diuni perfringens, en microbiologie des aliments, sont fondés sur la norme NF
l EN ISO 7937 (2005), intitulée « Méthode horizontale pour le dénombrement de
Clostridium perfringens — Technique par comptage des colonies ».