Campylobacter
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- soit une gélose de Karmali et une gélose de Preston (cf. infra, paragraphe
4.2.2.1.) en boîtes de Pétri.
Incuber les boîtes de Pétri à 42 °C pendant 24 à 72 heures en atmosphère
microaérophile (cf première partie, chapitre 2 « Matériel principal du laboratoire
de microbiologie » paragraphe 1.2.4.).
► Sans enrichissement
L’absence d’enrichissement est pratiquée en cas de suspicion d’une forte contamination en Campylobacter.
Préparer des subcultures comme ci-dessus à partir d’une suspension de l’aliment réalisée en bouillon de Preston non incubé.
Incuber les boîtes de Pétri à 42 °C pendant 24 à 72 heures en atmosphère
microaérophile.
4.2.2. Isolement sur milieux sélectifs
4.2.2.1. Gélose de Preston AES laboratoire
La gélose de Preston est destinée à l’isolement sélectif direct (sans enrichissement préalable) des Campylobacter à partir de tous types de prélèvements
(humains, animaux et d’environnement). Elle est aussi utilisée après enrichissement en bouillon de Preston en microbiologie des aliments.
► Mode de préparation
Mettre 12,5 g de poudre de bouillon nutritif à 2,5 % et 5 à 7,5 g d'agar dans
475 mL d’eau distillée ; porter à ébullition lentement en agitant jusqu'à complète
dissolution et stériliser à l’autoclave pendant 15 minutes à 121 °C.
Ramener le milieu à 42 ± 1 °C, poursuivre comme pour le bouillon de Preston.
mais sans ajouter de supplément de croissance.
► Ensemencement et incubation du milieu
En bactériologie alimentaire, ensemencer des boîtes de ce milieu à partir du
bouillon de Preston incubé ou non (cf. supra, paragraphe 4.2.1.2.).
|
Incuber à 42 °C pendant 24 à 72 heures en atmosphère microaérophile.
c □
; ► Lecture et interprétation du milieu
|
Les colonies de Campylobacter présentent des aspects variables : grisâtres ou
c translucides, rondes à bord net ou cultivant en nappe et s’étalant dans la direction
; des stries. Elles ne sont jamais rugueuses mais butyreuses.
Ces colonies doivent être confirmées (cf. infra, paragraphe 4.2.3.).
42.2.2. Campylobacter selon Karmali AES laboratoire
Le milieu sélectif pour Campylobacter selon Karmali est destiné à 1 isolement
de ces germes.
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- soit une gélose de Karmali et une gélose de Preston (cf. infra, paragraphe
4.2.2.1.) en boîtes de Pétri.
Incuber les boîtes de Pétri à 42 °C pendant 24 à 72 heures en atmosphère
microaérophile (cf première partie, chapitre 2 « Matériel principal du laboratoire
de microbiologie » paragraphe 1.2.4.).
► Sans enrichissement
L’absence d’enrichissement est pratiquée en cas de suspicion d’une forte contamination en Campylobacter.
Préparer des subcultures comme ci-dessus à partir d’une suspension de l’aliment réalisée en bouillon de Preston non incubé.
Incuber les boîtes de Pétri à 42 °C pendant 24 à 72 heures en atmosphère
microaérophile.
4.2.2. Isolement sur milieux sélectifs
4.2.2.1. Gélose de Preston AES laboratoire
La gélose de Preston est destinée à l’isolement sélectif direct (sans enrichissement préalable) des Campylobacter à partir de tous types de prélèvements
(humains, animaux et d’environnement). Elle est aussi utilisée après enrichissement en bouillon de Preston en microbiologie des aliments.
► Mode de préparation
Mettre 12,5 g de poudre de bouillon nutritif à 2,5 % et 5 à 7,5 g d'agar dans
475 mL d’eau distillée ; porter à ébullition lentement en agitant jusqu'à complète
dissolution et stériliser à l’autoclave pendant 15 minutes à 121 °C.
Ramener le milieu à 42 ± 1 °C, poursuivre comme pour le bouillon de Preston.
mais sans ajouter de supplément de croissance.
► Ensemencement et incubation du milieu
En bactériologie alimentaire, ensemencer des boîtes de ce milieu à partir du
bouillon de Preston incubé ou non (cf. supra, paragraphe 4.2.1.2.).
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Incuber à 42 °C pendant 24 à 72 heures en atmosphère microaérophile.
c □
; ► Lecture et interprétation du milieu
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Les colonies de Campylobacter présentent des aspects variables : grisâtres ou
c translucides, rondes à bord net ou cultivant en nappe et s’étalant dans la direction
; des stries. Elles ne sont jamais rugueuses mais butyreuses.
Ces colonies doivent être confirmées (cf. infra, paragraphe 4.2.3.).
42.2.2. Campylobacter selon Karmali AES laboratoire
Le milieu sélectif pour Campylobacter selon Karmali est destiné à 1 isolement
de ces germes.