Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification bactérienne
169
Les entérobactéries pouvant être TDA+ sont : Morganella morganii, Proteus
mirabilis, P. penneri, P. vulgaris, Providencia alcalifacienslrustigianii, Providentiel rettegeri, Providencia stuartii (cf. les pourcentages de résultats positifs
dans la galerie API 20 E biomérieux(" SA, deuxième partie, chapitre 5
« Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3.).
3.5.2. Milieu nutritif SIM VWÆ™ international (Merck)
Ce milieu de culture permet de détecter en 24 heures la production d’indole,
Information d’H2S et la mobilité qui interviennent dans l’identification des entérobactéries. Il correspond aux recommandations de l’APHA (1992) pour l’analyse des aliments.
► Composition chimique du milieu de culture
La composition type en g/L d’eau distillée de ce milieu est :
Peptone de caséine................................................................................ 20
Peptone de viande ................................................................................
6,6
Citrate ferrique ammoniacal................................................................. 0,2
Thiosulfate de sodium............................................................................ 0,2
Agar-agar.................................................................................................
3
pH 7,3 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 121 °C
Le milieu est préparé en tubes suivant les indications du fabricant à partir du
milieu déshydraté. Il est limpide et légèrement jaunâtre.
► Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer les tubes de milieu (gélose en culot) par piqûre profonde avec les
souches à étudier.
Incuber en aérobiose à l’étuve à 37 °C pendant 18 à 24 heures.
► Lecture et interprétation du milieu
|
Dans ce milieu :
~
- la peptone de viande riche en acides aminés soufrés, et éventuellement le
I thiosulfate de sodium permettent le test H2S (cf. supra, paragraphe 3.3.2.) ;
|
- la peptone de caséine, riche en tryptophane permet le test indole (cf. supra,
î Paragraphe 3.3.1.) ;
I
- la faible quantité d’agar-agar et l’ensemencement par piqûre centrale rendent
possible le test mobilité bactérienne (cf. supra, paragraphe 2.2.4.1.).
La lecture et l’interprétation de ces trois tests sont données dans le tableau 73.
| Des exemples de résultats de ces tests, obtenus avec des entérobactéries ont déjà
• été proposés dans ce chapitre (cf. supra, paragraphe 3.2.).
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Les entérobactéries pouvant être TDA+ sont : Morganella morganii, Proteus
mirabilis, P. penneri, P. vulgaris, Providencia alcalifacienslrustigianii, Providentiel rettegeri, Providencia stuartii (cf. les pourcentages de résultats positifs
dans la galerie API 20 E biomérieux(" SA, deuxième partie, chapitre 5
« Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3.).
3.5.2. Milieu nutritif SIM VWÆ™ international (Merck)
Ce milieu de culture permet de détecter en 24 heures la production d’indole,
Information d’H2S et la mobilité qui interviennent dans l’identification des entérobactéries. Il correspond aux recommandations de l’APHA (1992) pour l’analyse des aliments.
► Composition chimique du milieu de culture
La composition type en g/L d’eau distillée de ce milieu est :
Peptone de caséine................................................................................ 20
Peptone de viande ................................................................................
6,6
Citrate ferrique ammoniacal................................................................. 0,2
Thiosulfate de sodium............................................................................ 0,2
Agar-agar.................................................................................................
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pH 7,3 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 121 °C
Le milieu est préparé en tubes suivant les indications du fabricant à partir du
milieu déshydraté. Il est limpide et légèrement jaunâtre.
► Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer les tubes de milieu (gélose en culot) par piqûre profonde avec les
souches à étudier.
Incuber en aérobiose à l’étuve à 37 °C pendant 18 à 24 heures.
► Lecture et interprétation du milieu
|
Dans ce milieu :
~
- la peptone de viande riche en acides aminés soufrés, et éventuellement le
I thiosulfate de sodium permettent le test H2S (cf. supra, paragraphe 3.3.2.) ;
|
- la peptone de caséine, riche en tryptophane permet le test indole (cf. supra,
î Paragraphe 3.3.1.) ;
I
- la faible quantité d’agar-agar et l’ensemencement par piqûre centrale rendent
possible le test mobilité bactérienne (cf. supra, paragraphe 2.2.4.1.).
La lecture et l’interprétation de ces trois tests sont données dans le tableau 73.
| Des exemples de résultats de ces tests, obtenus avec des entérobactéries ont déjà
• été proposés dans ce chapitre (cf. supra, paragraphe 3.2.).