Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
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3.4.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer massivement la pente du milieu (de couleur jaunâtre-orange) avec
les souches bactériennes à étudier.
Incuber à 37 ± 1 °C pendant 5 à 48 heures et observer le tube de temps en
temps.
3.4.3. Lecture et interprétation du milieu
La mise en évidence de l’hydrolyse de l’urée se traduit par une alcalinisation
du milieu, qui fait virer le rouge de phénol (indicateur de pH) du jaune au rouge
en milieu basique : le test uréase est positif. Dans le cas contraire, le milieu est
jaune (test uréase négatif).
Parmi les entérobactéries pouvant être uréase+, se rencontrent
principalement : Enterobacter gergoviae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae subsp pneumoniae, Morganella morganii, Proteus mirabilis et
P. vulgaris, Providencia rettgeri, Yersinia enterocolitica (cf. les pourcentages de
résultats positifs dans la galerie API 20 E précitée).
Par contre, les Salmonella, souvent recherchées en bactériologie alimentaire,
sont uréase-.
Staphylococcus aureus, S. chromogenes, S. epidermidis, S. warneri... sont en
général uréase+ (cf. les pourcentages de résultats positifs dans la galerie API 20
Staph précitée).
3.4.4. Contrôle de qualité du milieu
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Proteus vulgaris ATCC 13315, Proteus
mirabilis ATCC 14153 et Morganella morganii ATCC 25830 sont uréase+
(coloration rouge). Escherichia coli ATCC 25922, Shigella flexneri ATCC
12022 et Salmonella Typhimurium ATCC 14028 sont uréase- (coloration jaune).
3.5.
Milieux de culture mixtes
Des milieux de culture ont été conçus pour la réalisation simultanée de plusieurs tests biochimiques relatifs au catabolisme des acides aminés. En voici
s deux exemples :
c □
* 3.5.1. Milieu urée-indole bioMérieux SA
Ce milieu de culture synthétique permet en 24 heures de réaliser trois tests
c biochimiques qui interviennent dans la différentiation et/ou dans 1 identification
| des entérobactéries : le test uréase, le test TDA et le test indole.
o
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3.4.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer massivement la pente du milieu (de couleur jaunâtre-orange) avec
les souches bactériennes à étudier.
Incuber à 37 ± 1 °C pendant 5 à 48 heures et observer le tube de temps en
temps.
3.4.3. Lecture et interprétation du milieu
La mise en évidence de l’hydrolyse de l’urée se traduit par une alcalinisation
du milieu, qui fait virer le rouge de phénol (indicateur de pH) du jaune au rouge
en milieu basique : le test uréase est positif. Dans le cas contraire, le milieu est
jaune (test uréase négatif).
Parmi les entérobactéries pouvant être uréase+, se rencontrent
principalement : Enterobacter gergoviae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae subsp pneumoniae, Morganella morganii, Proteus mirabilis et
P. vulgaris, Providencia rettgeri, Yersinia enterocolitica (cf. les pourcentages de
résultats positifs dans la galerie API 20 E précitée).
Par contre, les Salmonella, souvent recherchées en bactériologie alimentaire,
sont uréase-.
Staphylococcus aureus, S. chromogenes, S. epidermidis, S. warneri... sont en
général uréase+ (cf. les pourcentages de résultats positifs dans la galerie API 20
Staph précitée).
3.4.4. Contrôle de qualité du milieu
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Proteus vulgaris ATCC 13315, Proteus
mirabilis ATCC 14153 et Morganella morganii ATCC 25830 sont uréase+
(coloration rouge). Escherichia coli ATCC 25922, Shigella flexneri ATCC
12022 et Salmonella Typhimurium ATCC 14028 sont uréase- (coloration jaune).
3.5.
Milieux de culture mixtes
Des milieux de culture ont été conçus pour la réalisation simultanée de plusieurs tests biochimiques relatifs au catabolisme des acides aminés. En voici
s deux exemples :
c □
* 3.5.1. Milieu urée-indole bioMérieux SA
Ce milieu de culture synthétique permet en 24 heures de réaliser trois tests
c biochimiques qui interviennent dans la différentiation et/ou dans 1 identification
| des entérobactéries : le test uréase, le test TDA et le test indole.
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