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Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
- le milieu de Kligler (c/. supra, paragraphe 2.2.3.1.) ou Kligler-Hajna, auquel
l'interprétation donnée pour le test H2S peut être appliquée, car il contient une
peptone de viande en grande quantité ; le thiosulfate de sodium (en faible quantité) sert également de source de soufre aux bactéries et peut être réduit en H,S
en présence d'une réductase.
La galerie API 20 E bioMérieux® SA d’identification des entérobactéries et
autres bacilles à Gram- (c/. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae
(entérobactéries) », paragraphe 7.3.) contient également le test H2S, très utile
dans l'identification de ces germes.
Les principales entérobactéries pouvant être H2S+ sont : Citrobacter brakii,
Citrobacter freundii, Citrobacter youngae, Proteus mirabilis et P. vulgaris, Salmonella enterica subsp. arizonae, Salmonella enterica {ex-Salmonella choierassuis), Salmonella spp., Salmonella Pullorum (c/. les pourcentages de résultats
positifs dans la galerie précitée).
3.4.
Milieux de culture pour la dégradation de l’urée
L'urée est un composé organique qui peut servir de source d’azote unique aux
bactéries possédant une uréase. En présence de cette enzyme, les bactéries uréolytiques peuvent décomposer l’urée en carbonate d'ammonium qui basifie le
milieu de culture.
Il en résulte un test biochimique : le test uréase qui est utile dans l’identification des entérobactéries. Il peut être réalisé sur plusieurs milieux de culture dont
le milieu urée-indole {cf- infra, paragraphe 3.5.1.), l’agar à l’urée selon Christensen VWR™ International (Merck) {cf. infra, paragraphe 3.4.1.) ...
Par ailleurs, les galeries APE 20 E, API® 20 Staph... bioMérieux0 SA
contiennent le test uréase dans l’identification des entérobactéries et autres
bacilles à Gram-, des staphylocoques...{cf. deuxième partie, chapitre 5
« Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3. et chapitre 9
« Staphylococcus. Micrococcus et ex-Micrococcus », paragraphe 6.3.1).
3.4.1. ( (imposition chimique de l’agar à Purée selon Christensen
La composition chimique type en g/L d’eau distillée de ce milieu de culture
est :
Peptone de viande...............................................
1
D (+)-glucose...................................................
1
Chlorure de sodium....................................
5
Dihydrogénophosphate de potassium..................................................
2
Rouge de phénol...............................................
0,012
Agar-agar.................................................
12
Urée‘.......................................................................................................... 20
pH 6.8 ± 0.2 à 25 °C
I Après Stérilisation à l'autoclave (15 minutes à 121 °C). ajouter l'urée suivant les indications du
fabricant.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
- le milieu de Kligler (c/. supra, paragraphe 2.2.3.1.) ou Kligler-Hajna, auquel
l'interprétation donnée pour le test H2S peut être appliquée, car il contient une
peptone de viande en grande quantité ; le thiosulfate de sodium (en faible quantité) sert également de source de soufre aux bactéries et peut être réduit en H,S
en présence d'une réductase.
La galerie API 20 E bioMérieux® SA d’identification des entérobactéries et
autres bacilles à Gram- (c/. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae
(entérobactéries) », paragraphe 7.3.) contient également le test H2S, très utile
dans l'identification de ces germes.
Les principales entérobactéries pouvant être H2S+ sont : Citrobacter brakii,
Citrobacter freundii, Citrobacter youngae, Proteus mirabilis et P. vulgaris, Salmonella enterica subsp. arizonae, Salmonella enterica {ex-Salmonella choierassuis), Salmonella spp., Salmonella Pullorum (c/. les pourcentages de résultats
positifs dans la galerie précitée).
3.4.
Milieux de culture pour la dégradation de l’urée
L'urée est un composé organique qui peut servir de source d’azote unique aux
bactéries possédant une uréase. En présence de cette enzyme, les bactéries uréolytiques peuvent décomposer l’urée en carbonate d'ammonium qui basifie le
milieu de culture.
Il en résulte un test biochimique : le test uréase qui est utile dans l’identification des entérobactéries. Il peut être réalisé sur plusieurs milieux de culture dont
le milieu urée-indole {cf- infra, paragraphe 3.5.1.), l’agar à l’urée selon Christensen VWR™ International (Merck) {cf. infra, paragraphe 3.4.1.) ...
Par ailleurs, les galeries APE 20 E, API® 20 Staph... bioMérieux0 SA
contiennent le test uréase dans l’identification des entérobactéries et autres
bacilles à Gram-, des staphylocoques...{cf. deuxième partie, chapitre 5
« Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3. et chapitre 9
« Staphylococcus. Micrococcus et ex-Micrococcus », paragraphe 6.3.1).
3.4.1. ( (imposition chimique de l’agar à Purée selon Christensen
La composition chimique type en g/L d’eau distillée de ce milieu de culture
est :
Peptone de viande...............................................
1
D (+)-glucose...................................................
1
Chlorure de sodium....................................
5
Dihydrogénophosphate de potassium..................................................
2
Rouge de phénol...............................................
0,012
Agar-agar.................................................
12
Urée‘.......................................................................................................... 20
pH 6.8 ± 0.2 à 25 °C
I Après Stérilisation à l'autoclave (15 minutes à 121 °C). ajouter l'urée suivant les indications du
fabricant.