Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
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k Lecture et interprétation du milieu
Rechercher la présence d’indole par la méthode de Kovacs en ajoutant 0,5 mL
de réactif de Kovacs dans la culture. La couche alcoolique se séparera de la couche aqueuse et prendra une teinte rouge si le test indole est positif ; sinon, il
conserve sa couleur jaune et le test indole est négatif.
Les résultats du test indole chez des entérobactéries sont présentés dans le
tableau 71.
Tableau 71 ■ Résultats du test indole chez des entérobactéries.
Entérobactéries
Test indole
Citrobacter freundii
-
Enterobacter cloacae, E. aerogenes, Enterobacter aerogenes ATCC
130481
-
Escherichia coli, Escherichia coli ATCC 259221
+
Klebsiella oxytoca
+
Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae
-
Morganella morganii, Proteus vulgaris. Proteus vulgaris ATCC 13315'.
Providencia
+
Proteus mirabilis, Proteus mirabilis ATCC 259331
-
Salmonella spp., Salmonella Enteritidis ATCC 130761
-
Serratia niarcescens subsp. marcescens
-
Yersinia enterocolitica
d
d : Variable selon les souches.
1. Souches utilisées en contrôle de qualité Bio-Rad du milieu (culture positive, résultats du test indole après
24 heures à 37 °C).
3.3.2.
Dégradation des acides aminés soufrés
Des peptones telles que les peptones pepsiques de viande sont riches en acides
_ aminés soufrés (cystine, cystéine, méthionine) (cf première partie, chapitre 3
? « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture », paragraphe
j 2.1.1.2.).
A partir de ceux-ci, des bactéries peuvent produire de l'H2S en présence de
| désulfurases ; l’H2S se combine à un sel de fer (citrate de fer ammoniacal, sulfate
o ferreux ammoniacal...) contenu dans le milieu de culture pour donner du sulfure
| de fer de couleur noire.
Le test biochimique qui en résulte est le test H2S, qui peut être réalisé sur plu3 sieurs milieux de culture dont :
|
- le milieu nutritif SIM (cf infra, paragraphe 3.5.2.) ;
o