Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
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Les résultats de ces trois tests biochimiques sont donnés pour des entérobactéries dans le tableau 68, d’après plusieurs sources.
Tableau 68 ■ Résultats des trois tests chez des entérobactéries.
Entérobactéries
Couleur pente/
test LDA
Couleur culot/
test LDC1
Test H.S1
Citrobacter
Violet/LDA+
Jaune/LDC+
Enterobacter cloacae
Violet/LDA+
-
Escherichia
Violet/LDA+
Violet/jaune
-
Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae
Violet/LDA+
Violet/LDC+
-
Proteus vulgaris et P. mirabilis
Jaune/LDC_ 2
Providencia
Rouge/LDA+
-
Salmonella enterica subsp. arizonae
Violet/LDA+
Violet/LDC+
+
Salmonella
Violet/LDA+
Violet/LDC+
+
1. Pour des résultats plus précis avec les tests LDC et H,S : cf. tests similaires et pourcentages de résultats
positifs dans la galerie API 20 E bioMérieux® SA, deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae
(entérobactéries) », paragraphe 7.3
2. En général H2S+, caractère n’apparaissant pas sur ce milieu car test LDC-.
3.2.12. Technique de Le Minor
► Mode opératoire
Dans un tube à hémolyse vide stérile, déposer 5 gouttes d'une solution à 0,5 %
de L-phénylalanine (conservée à +4°C) et 5 gouttes d’eau physiologique à
8,5 g/L en NaCl.
Faire dans ce mélange une bonne suspension de bactéries prélevées sur une
culture de 18 heures sur milieu gélosé (gélose trypcase soja, par exemple).
Incuber à 37 °C pendant deux heures environ au bain-marie ou dans une étuve.
Ajouter une goutte d’une solution aqueuse de chlorure ferrique (FeCl3) au 1/3
f et observer,
c □
► Lecture et interprétation du milieu
La phénylalanine est transformée en acide phényl-pyruvique (APP) et en
e ammoniac en présence de la phénylalanine désaminase (PDA).
|
Le virage immédiat de la suspension bactérienne au vert correspond à un test
| PDA (ou APP) positif. Dans le cas d'un test PDA négatif, le chlorure ferrique
, conserve sa couleur.
।
Dans la famille des entérobactéries, un test PDA+ est caractéristique des ProI teus (P. vulgaris, P. mirabilis...) et des Providencia. Le test PDA est négatif
avec Escherichia coli, par exemple.
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Les résultats de ces trois tests biochimiques sont donnés pour des entérobactéries dans le tableau 68, d’après plusieurs sources.
Tableau 68 ■ Résultats des trois tests chez des entérobactéries.
Entérobactéries
Couleur pente/
test LDA
Couleur culot/
test LDC1
Test H.S1
Citrobacter
Violet/LDA+
Jaune/LDC+
Enterobacter cloacae
Violet/LDA+
-
Escherichia
Violet/LDA+
Violet/jaune
-
Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae
Violet/LDA+
Violet/LDC+
-
Proteus vulgaris et P. mirabilis
Jaune/LDC_ 2
Providencia
Rouge/LDA+
-
Salmonella enterica subsp. arizonae
Violet/LDA+
Violet/LDC+
+
Salmonella
Violet/LDA+
Violet/LDC+
+
1. Pour des résultats plus précis avec les tests LDC et H,S : cf. tests similaires et pourcentages de résultats
positifs dans la galerie API 20 E bioMérieux® SA, deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae
(entérobactéries) », paragraphe 7.3
2. En général H2S+, caractère n’apparaissant pas sur ce milieu car test LDC-.
3.2.12. Technique de Le Minor
► Mode opératoire
Dans un tube à hémolyse vide stérile, déposer 5 gouttes d'une solution à 0,5 %
de L-phénylalanine (conservée à +4°C) et 5 gouttes d’eau physiologique à
8,5 g/L en NaCl.
Faire dans ce mélange une bonne suspension de bactéries prélevées sur une
culture de 18 heures sur milieu gélosé (gélose trypcase soja, par exemple).
Incuber à 37 °C pendant deux heures environ au bain-marie ou dans une étuve.
Ajouter une goutte d’une solution aqueuse de chlorure ferrique (FeCl3) au 1/3
f et observer,
c □
► Lecture et interprétation du milieu
La phénylalanine est transformée en acide phényl-pyruvique (APP) et en
e ammoniac en présence de la phénylalanine désaminase (PDA).
|
Le virage immédiat de la suspension bactérienne au vert correspond à un test
| PDA (ou APP) positif. Dans le cas d'un test PDA négatif, le chlorure ferrique
, conserve sa couleur.
।
Dans la famille des entérobactéries, un test PDA+ est caractéristique des ProI teus (P. vulgaris, P. mirabilis...) et des Providencia. Le test PDA est négatif
avec Escherichia coli, par exemple.