Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
157
Cette recherche est réalisée sur une gélose au lait qui peut être obtenue comme
suit :
- préparer 100 mL d’une solution d'agar à 3% dans de l’eau distillée et
100 mL de lait écrémé et stériliser à l’autoclave aux températures recommandées
(15 minutes à 121 °C pour l’agar et 15 minutes à 115 °C pour le lait) ;
- ramener les deux préparations à 45 °C, les mélanger et couler en boîtes de
Pétri.
Ensemencer en points avec les souches à tester.
Incuber à la température adéquate (30 °C, 37 °C...) pendant 1 à 8 jours.
► Lecture et interprétation du milieu
Les zones d’éclaircissement du milieu autour des colonies traduisent un résultat caséinolyse-t- (Bacillus subtilis, P s. aeruginosa...) ; l'absence de telles zones
exprime un test caséinolyse3.2.
Milieux de culture pour bactéries dégradant les acides aminés
3.2.1. Par la voie des désaminases (désamination)
La mise en évidence des désaminases de la lysine, de la phénylalanine et du
tryptophane forme trois tests biochimiques utiles principalement dans l'identification des entérobactéries :
- la recherche de la lysine-désaminase (test LDA) se pratique sur une gélose
lysine-fer (cf. infra, paragraphe 3.2.1.1.) ;
- la recherche de la désaminase du tryptophane (test TDA) peut être réalisée
sur le milieu urée-indole (cf. infra, paragraphe 3.5.1.) ;
- la recherche de la phénylalanine-désaminase (test PDA ou APP), peu pratiquée, est proposée selon la technique ancienne de Le Minor (cf. infra, paragraphe
3.2.1.2.).
Seul, le test TDA est présent dans la galerie API 20 E bioMérieux " SA d identification des entérobactéries et autres bacilles à Gram- [cf. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3.].
S 3.2.1.1. Gélose lysine fer AES Laboratoire
□
®
Ce milieu est utilisé pour l'identification des entérobactéries, principalement
| des Salmonella, y compris Salmonella enterica subsp. arizonae.
•
Il permet, en 24 heures, de mettre simultanément en évidence une lysine décar| boxylase, une lysine désaminase et la production d'hydrogène sulfuré.
3
«
157
Cette recherche est réalisée sur une gélose au lait qui peut être obtenue comme
suit :
- préparer 100 mL d’une solution d'agar à 3% dans de l’eau distillée et
100 mL de lait écrémé et stériliser à l’autoclave aux températures recommandées
(15 minutes à 121 °C pour l’agar et 15 minutes à 115 °C pour le lait) ;
- ramener les deux préparations à 45 °C, les mélanger et couler en boîtes de
Pétri.
Ensemencer en points avec les souches à tester.
Incuber à la température adéquate (30 °C, 37 °C...) pendant 1 à 8 jours.
► Lecture et interprétation du milieu
Les zones d’éclaircissement du milieu autour des colonies traduisent un résultat caséinolyse-t- (Bacillus subtilis, P s. aeruginosa...) ; l'absence de telles zones
exprime un test caséinolyse3.2.
Milieux de culture pour bactéries dégradant les acides aminés
3.2.1. Par la voie des désaminases (désamination)
La mise en évidence des désaminases de la lysine, de la phénylalanine et du
tryptophane forme trois tests biochimiques utiles principalement dans l'identification des entérobactéries :
- la recherche de la lysine-désaminase (test LDA) se pratique sur une gélose
lysine-fer (cf. infra, paragraphe 3.2.1.1.) ;
- la recherche de la désaminase du tryptophane (test TDA) peut être réalisée
sur le milieu urée-indole (cf. infra, paragraphe 3.5.1.) ;
- la recherche de la phénylalanine-désaminase (test PDA ou APP), peu pratiquée, est proposée selon la technique ancienne de Le Minor (cf. infra, paragraphe
3.2.1.2.).
Seul, le test TDA est présent dans la galerie API 20 E bioMérieux " SA d identification des entérobactéries et autres bacilles à Gram- [cf. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3.].
S 3.2.1.1. Gélose lysine fer AES Laboratoire
□
®
Ce milieu est utilisé pour l'identification des entérobactéries, principalement
| des Salmonella, y compris Salmonella enterica subsp. arizonae.
•
Il permet, en 24 heures, de mettre simultanément en évidence une lysine décar| boxylase, une lysine désaminase et la production d'hydrogène sulfuré.
3
«